目的 探究没食子酸(GA)对人食管癌TE-1细胞的体外抑制作用及潜在机制.方法 MTT法检测GA作用24 h和48 h后对TE-1细胞增殖的影响,细胞荧光计数(CCK-F)法和倒置荧光显微镜观察GA作用后TE-1细胞的数量变化和形态变化,划痕实验检测细胞迁移能力的变化,平板集落形成实验检测GA对TE-1细胞集落形成能力的影响,流式细胞术检测细胞凋亡情况,荧光探针(DCFH-DA)法观察活性氧(ROS)产生情况;Western blot法检测胱天蛋白酶3(caspase-3)、caspase-9、B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)和细胞周期蛋白D1(cyclin D1)、cyclin D3的表达水平.结果 GA能够明显降低TE-1细胞的增殖能力,且有时间和浓度依赖趋势,其对细胞的半数抑制浓度分别为(281.22±26.81)μmol/L(24 h)和(220.90±31.15)μmol/L(48 h).与对照组比较,给药组细胞出现皱缩、排列稀疏、细胞核固缩等现象,且细胞数量明显减少.与对照组比较,给药组细胞的细胞迁移能力和集落形成能力均显著降低(P<0.01或P<0.05).经100、300、500μmol/L的GA作用24 h后,细胞凋亡率分别为(6.21±0.32)％、(12.59±0.58)％和(15.41±0.41)％,均显著高于对照组的(5.29±0.28)％(P<0.01或P<0.05);除100μmol/L GA组外,其余给药组细胞ROS的产生水平均显著提高(P<0.01或P<0.05);与对照组比较,各给药组细胞中Bcl-2(仅GA 200μmol/L组)、Bax(GA 100μmol/L组除外)、caspase-3、caspase-9(GA 100μmol/L组除外)的表达水平均显著升高(P<0.01或P<0.05),Bcl-2(GA 100、200μmol/L组除外)、cyclin D1、cyclin D3蛋白的表达水平均显著降低(P<0.01或P<0.05).结论 GA能够抑制人食管癌TE-1细胞的增殖,限制其迁移能力及集落形成能力,促进其凋亡;上述作用可能与该成分可提高ROS水平并上调促凋亡蛋白caspase-3、caspase-9、Bax的表达,下调抗凋亡蛋白Bcl-2和细胞周期蛋白cyclin D1、cyclin D3的表达有关.

没食子酸;食管癌;凋亡;活性氧;TE-1细胞

吴昊;努兰·拜都拉;刘琳玉;任艳利

伊犁师范大学生物与地理科学学院,新疆伊宁 835000;伊犁师范大学微生物资源保护与开发利用重点实验室,新疆伊宁 835000

中国药房

[1]吴昊;努兰·拜都拉;刘琳玉;任艳利-.没食子酸对人食管癌TE-1细胞的体外抑制作用及其机制)[J].中国药房,2022(12):1448-1454

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