目的 探讨山柰酚(KAE)对脑缺血/再灌注(CI/R)损伤的体内外保护作用机制.方法 首先利用网络药理学方法初步筛选KAE治疗CI/R损伤的潜在作用靶点.然后采用AutoDock Vina软件将KAE分别与排名前10位的核心靶点进行分子对接,以结合亲和力作为评价标准,进一步明确KAE治疗CI/R损伤的可能作用机制.最后通过体内外实验验证以上结果,即构建氧糖剥夺/再灌注(OGD/R)HT22细胞损伤模型和大脑中动脉阻塞(MCAO)大鼠模型,采用CCK-8法检测细胞活性,分别对大鼠及其脑组织进行神经功能评分和TTC染色,采用Western blot法检测HT22细胞和大鼠脑组织中蛋白激酶B(Akt)、Src蛋白的磷酸化水平.结果 网络药理学筛选结果显示,KAE治疗CI/R损伤与前列腺素内过氧化物合成酶2、基质金属蛋白酶9、JUN、Akt1、肿瘤坏死因子、胱天蛋白酶3、丝裂原激活蛋白激酶8、细胞间黏附分子1、血管细胞黏附分子1、Src蛋白10个核心靶点密切相关.分子对接结果显示,KAE与Akt1、Src蛋白结合稳定.体内外实验结果表明,KAE可显著提高OGD/R损伤HT22的细胞存活率(P<0.05),显著降低MCAO模型大鼠的神经功能评分(P<0.05),显著减小大鼠脑梗死体积(P<0.05),显著升高HT22细胞和大鼠脑组织中Akt、Src蛋白的磷酸化水平(P<0.05),且呈剂量依赖趋势.结论 KAE可能通过调控Akt、Src蛋白的磷酸化水平来发挥脑保护作用,从而治疗CI/R损伤.

山柰酚;脑缺血/再灌注损伤;网络药理学;分子对接;保护作用;HT22细胞;大鼠

空军军医大学第一附属医院药剂科,西安 710032

[1]徐芳琴;郭超;王婧雯-.山柰酚对脑缺血/再灌注损伤的体内外保护作用机制研究)[J].中国药房,2022(17):2065-2071

KAE

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