目的 探讨葛根芩连汤缓解肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)诱导的人结肠癌Caco-2细胞氧化应激损伤作用及其配伍规律.方法 将Caco-2细胞随机分为对照组、TNF-α(80μg/L)组、小檗碱(6.73μg/mL)组及葛根芩连汤配伍组(全方组、去甘草组、去葛根组、葛根甘草组和黄芩黄连组,18.75 μg/mL).除对照组外,其余各组细胞给予TNF-α预处理2h,再给予相应药物处理24h.MTT检测Caco-2细胞活力;流式细胞术检测细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平;比色法检测细胞中总超氧化物歧化酶(total superoxide dismutase,T-SOD)活性和丙二醛(malondialdehyde,MDA)、还原型谷胱甘肽(glutathione,GSH)水平;qRT-PCR和Western blotting分别检测核因子E2相关因子2(nuclear factor erythroid 2-related factor 2,Nrf2)、还原型辅酶 Ⅰ/Ⅱ 醌氧化还原酶 1[NAD(P)H quinine oxidoreductase 1,NQO1]和血红素氧合酶-1(hemeoxygenase 1,HO-1)mRNA和蛋白表达;荧光显微镜观察Nrf2蛋白入核情况.结果 5.0～25.0μg/mL的含药培养基和10～80μg/L的TNF-α对Caco-2细胞活性无明显影响.与TNF-α组比较,各给药组Caco-2细胞ROS水平显著降低(P＜0.01);除去葛根组和黄芩黄连组外,其余各组MDA水平显著降低(P＜0.01),GSH水平明显升高(P＜0.01);除去葛根组外,其余各给药组Nrf2 基因表达明显升高(P＜0.01),全方组和去甘草组NQO1基因表达明显升高(P＜0.05、0.01),全方组和葛根甘草组HO-1基因表达明显升高(P＜0.05、0.01);除黄芩黄连组外,其余各组Nrf2和HO-1蛋白表达显著升高(P＜0.01);除去葛根组和黄芩黄连组外,其余各组NQO1蛋白水平显著升高(P＜0.05、0.01),Nrf2蛋白入核明显增加(P＜0.05、0.01).结论 缺少葛根对葛根芩连汤抑制Caco-2细胞氧化应激损伤有较大影响.

葛根芩连汤;葛根;配伍规律;氧化应激;结肠癌细胞

林川;董文敏;张倩芸;刘王振祖;梁琨;王新宏;安叡

上海中医药大学中药学院,上海 201203;复旦大学附属浦东医院,上海 201200

中草药

[1]林川;董文敏;张倩芸;刘王振祖;梁琨;王新宏;安叡-.葛根芩连汤抑制TNF-α诱导的Caco-2细胞氧化损伤配伍规律研究)[J].中草药,2022(20):6492-6499

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