背景与目的:传统前列腺癌皮下移植瘤模型的建立采取细胞悬液注射方式,但该方式存在较大局限性.探索利用细胞膜片技术构建新型前列腺癌皮下移植瘤动物模型的可行性.方法:将人前列腺癌细胞系DU145接种至35 mm温度敏感性细胞培养皿中,连续培养制备前列腺癌细胞膜片,并采用H-E染色和免疫组织化学方法鉴定.根据研究目的,设置细胞悬液组和细胞膜片组,细胞悬液组在BALB/c裸小鼠皮下注射DU145细胞悬液,细胞膜片组在裸小鼠皮下注射DU145细胞膜片.移植后4周处死裸小鼠,剥离两组移植瘤作进一步组织学分析,包括胶原纤维含量、局部浸润及血管生成情况.同时,解剖前列腺癌常见的转移脏器,如骨、肺和肝脏等,评估两组的全身转移情况.结果:培养1周后可制备前列腺癌DU145细胞膜片,大体观察呈现半透明胶质薄片,具备较好的组织学强度.组织学染色见膜片状结构,平均厚度约为(32.6±?7.5)μm.DU145细胞标志物vimentin高表达,E-cadherin低表达,胶原纤维含量丰富,在膜片中高表达.皮下移植4周后,H-E染色显示,细胞膜片组肿瘤结构致密,有明显周围肌肉浸润,而细胞悬液组肿瘤存在较多空泡,与周围组织边界清楚.皮下移植4周后,细胞膜片组移植瘤体积明显大于细胞悬液组,两组测量肿瘤体积分别为(0.967±0.129)和(0.437±0.054)cm3(t=3.774,P=0.0195).马松染色显示,细胞膜片组蓝色胶原纤维含量明显高于细胞悬液组,两组吸光度(D)值分别为0.0230±0.0011和0.0140±0.0007(t=7.022,P=0.0001).CD31免疫组织化学染色表明,在200倍显微镜视野下细胞膜片组和细胞悬液组移植瘤组织中微血管密度分别为53.20±3.56和32.40±4.98(t=3.392,P=0.0095).皮下移植4周后,两组通过大体解剖和H-E染色均未见到明显的全身转移病灶.结论:利用细胞膜片技术构建前列腺癌皮下移植瘤动物模型具备可行性和一定优势,与传统细胞悬液注射方式相比,成瘤体积更大,与周围组织浸润程度更深,新生微血管密度更高,胶原含量丰富,更有助于揭示前列腺癌真实的生物学特征,有望应用于前列腺癌分子遗传学研究、肿瘤耐药机制及新药研发等领域.

细胞膜片技术;前列腺癌模型;异位移植;肿瘤微环境

周术奎;张东亮;王翔;刘磊;李曾;杨盛柯;廖洪

四川省肿瘤医院·研究所,四川省癌症防治中心,电子科技大学医学院泌尿外科,四川 成都 610041;上海交通大学附属第一人民医院泌尿外科,上海 200080

中国癌症杂志

[1]周术奎;张东亮;王翔;刘磊;李曾;杨盛柯;廖洪-.利用细胞膜片技术构建新型前列腺癌皮下移植瘤动物模型)[J].中国癌症杂志,2022(03):200-206

细胞膜片技术,前列腺癌模型

技术构建,皮下移植瘤动物模型,皮下移植瘤模型,细胞悬液,前列腺癌细胞,细胞系,DU145,温度敏感性,细胞培养,培养皿,连续培养,癌细胞膜,免疫组织化学方法,研究目的,BALB,裸小鼠,皮下注射,处死,组织学分析,胶原纤维,纤维含量,局部浸润,血管生成,脏器,移情,半透明,透明胶,薄片,组织学染色,片状结构,vimentin,cadherin,低表达,空泡,周围组织,组织边界,肿瘤体积,cm3,蓝色,吸光度,CD31,免疫组织化学染色,移植瘤组织,微血管密度,见到,移病,成瘤,组织浸润,浸润程度,生物学特征,分子遗传学,遗传学研究,肿瘤耐药机制,新药研发,异位移植,肿瘤微环境

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