典型文献
克氏原螯虾Rab5、Rab6蛋白及其抗体对血淋巴细胞吞噬活性的影响
文献摘要：
为研究克氏原螯虾(Procambarus clarkii)Rab5(PcRab5)和Rab6(PcRab6)的生物学功能,利用同源重组技术构建了克氏原螯虾pET-B2m-PcRab5和pET-B2m-PcRab6原核表达载体,并进行了诱导表达和多克隆抗体的制备,采用ELISA和Western Blot技术检测了抗体效价和特异性.将PcRab5和PcRab6的原核表达蛋白和多克隆抗体注射到健康克氏原螯虾体内,研究了其对血淋巴细胞吞噬活性的影响.实验结果表明构建的pET-B2m-PcRab5和pET-B2m-PcRab6原核表达载体经诱导后可表达目的蛋白,分子量均为67 kD,纯化后蛋白条带单一,纯度较高.重组表达纯化后的PcRab5和PcRab6蛋白免疫日本大耳兔分别获得效价为1∶2048 K和1∶512 K的兔抗血清,制备的抗体可分别特异性识别PcRab5和PcRab6蛋白.将PcRab5和PcRab6蛋白注射健康克氏原螯虾后,其血淋巴细胞中可吞噬荧光微球的细胞比例分别显著上升至38％和30％(P＜0.01).而将纯化的PcRab5和PcRab6多克隆抗体分别注射至螯虾体内后,其血淋巴细胞的吞噬细胞比例均出现显著下降(P＜0.05),PcRab5和PcRab6蛋白参与了血淋巴细胞吞噬功能.实验为进一步研究克氏原螯虾PcRab5和PcRab6分子功能奠定基础,也可为理解甲壳动物Rab5和Rab6在血淋巴细胞吞噬功能中的作用提供帮助.
文献关键词：
Rab蛋白;同源重组;蛋白表达;抗体制备;血淋巴细胞;吞噬活性;克氏原螯虾
中图分类号：
作者姓名：
朱雷;赵彤;王欣茹;蒋昕彧;候利波;孔祥会
作者机构：
河南师范大学水产学院,新乡453007
文献出处：
引用格式：
[1]朱雷;赵彤;王欣茹;蒋昕彧;候利波;孔祥会-.克氏原螯虾Rab5、Rab6蛋白及其抗体对血淋巴细胞吞噬活性的影响)[J].水生生物学报,2022(09):1285-1292
A类：
Rab6,PcRab5,PcRab6,B2m
B类：
克氏原螯虾,白及,血淋巴细胞,细胞吞噬,吞噬活性,Procambarus,clarkii,生物学功能,同源重组,重组技术,技术构建,pET,原核表达载体,诱导表达,多克隆抗体,Blot,抗体效价,射到,目的蛋白,分子量,kD,白条,条带,重组表达,表达纯化,兔抗血清,特异性识别,荧光微球,吞噬细胞,白参,吞噬功能,解甲,甲壳动物,抗体制备
AB值：
0.183348
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