典型文献
鲍疱疹病毒原位LAMP检测方法的建立与初步应用
文献摘要:
为精确定位鲍疱疹病毒(HaHV-1)在宿主不同组织器官中的分布,明确HaHV-1的组织亲嗜性和侵染进程,实验基于环介导等温扩增技术(LAMP)和原位杂交技术建立了HaHV-1的原位LAMP检测方法.利用该方法研究了HaHV-1人工感染实验不同时间节点,病毒在杂色鲍主要器官的分布规律和组织亲嗜性.并对已报道的HaHV-1 LAMP扩增引物进行优化,实现对载玻片上原位固定靶组织内病毒DNA的稳定、特异扩增,筛选最佳显色时间等原位杂交反应条件,最后通过免疫酶标技术分析HaHV-1在组织样本内的分布情况.结果显示,HaHV-1原位LAMP检测方法最适显色时间为60 min.利用该方法对攻毒后24、36、48、60和72 h,HaHV-1在杂色鲍外套膜、鳃、肝胰腺和腹足神经节4种样本的组织分布情况进行检测和分析.病毒阳性信号最早于36 h出现在腹足神经节,48 h在部分外套膜样本中观察到病毒阳性信号,分布局限于外周神经中.在感染实验后期,病毒阳性信号出现在肝胰腺结缔组织中.病毒阳性信号出现的部位常有大量细胞渗出和浸润,渗出的细胞中可见被病毒感染的血淋巴细胞.本研究建立的HaHV-1原位LAMP检测方法,同步实现了高灵敏度和精确定位的功能.该检测方法适用于病毒感染的确诊、不同组织器官的亲嗜性、病毒侵染途径和致病机理等相关研究.
文献关键词:
杂色鲍;鲍疱疹病毒;原位LAMP;检测方法
中图分类号:
作者姓名:
谷莉;郑玉东;张翔;白昌明;刘金兰;辛鲁生;李晨;王崇明
作者机构:
天津农学院水产学院,天津市水产生态及养殖重点实验室,天津 300384;中国水产科学研究院黄海水产研究所,青岛海洋科学与技术国家实验室海洋渔业科学与食物产出过程功能实验室,农业农村部海水养殖病害防治重点实验室,青岛市海水养殖流行病学与生物安保重点实验室,山东 青岛 266071;中国海洋大学,水产动物病害与免疫学实验室,山东 青岛 266000
文献出处:
引用格式:
[1]谷莉;郑玉东;张翔;白昌明;刘金兰;辛鲁生;李晨;王崇明-.鲍疱疹病毒原位LAMP检测方法的建立与初步应用)[J].水产学报,2022(05):885-894
A类:
鲍疱疹病毒,HaHV
B类:
LAMP,初步应用,精确定位,宿主,不同组织,组织器官,环介导等温扩增技术,原位杂交,杂交技术,人工感染,时间节点,杂色鲍,扩增引物,载玻片,上原,靶组织,显色,反应条件,免疫酶,对攻,攻毒,外套膜,肝胰腺,腹足,神经节,组织分布,病毒阳性,早于,分外,外周神经,结缔组织,渗出,血淋巴细胞,高灵敏度,病毒侵染,侵染途径,致病机理
AB值:
0.269402
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