典型文献
鼠源抗CD47单克隆抗体的筛选及活性评价
文献摘要：
通过杂交瘤技术筛选得到了一株鼠源抗白细胞分化抗原47(CD47)单克隆抗体.采用聚乙二醇融合法,将小鼠脾细胞与SP2/0细胞融合,通过酶联免疫吸附试验(ELISA)法筛选抗CD47的杂交瘤细胞,通过Protein G亲和柱纯化抗体,利用十二烷基磺酸钠(SDS)-聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)法检测目的蛋白的相对分子质量,通过生物分子相互作用分析仪检测目的抗体的亲和力,并通过ELISA法测定抗CD47抗体的信号调节蛋白α(SIRPα)的阻断效力.用藻红蛋白(PE)标记的Raji细胞与不同浓度的抗CD47单抗共同孵育,检测抗CD47抗体促进巨噬细胞吞噬的作用.采用血凝试验对抗CD47单抗导致红细胞凝集的能力进行了分析,并进一步通过小鼠实体瘤模型,考察抗CD47单抗的抑制肿瘤生长作用.结果 显示,筛选得到的一株杂交瘤细胞,即抗CD47单克隆抗体3D8,其亲和力常数值为1.29×10-11 moi/L,ELISA法测得其半数有效浓度(EC50)值为0.17nmol/L,可有效阻断CD47与SIRPα的相互作用,增强巨噬细胞吞噬肿瘤细胞的能力,吞噬率达85％.该抗体在亲和力、阻断力、吞噬率等方面均优于在售抗体,同时不会导致红细胞凝集.在小鼠实体瘤模型中,肿瘤生长抑制率为95.44％,可明显抑制肿瘤生长.本研究为后期抗CD47抗体的人源化和抗CD47抗体的临床前研究提供了参考.
文献关键词：
抗CD47单克隆抗体;杂交瘤技术;亲和力;红细胞凝集;抗肿瘤活性
中图分类号：
作者姓名：
朱中松;赵丽丽;张贵民;曹宇;刘忠
作者机构：
山东新时代药业有限公司,山东临沂273400;哺乳动物细胞高效表达国家工程实验室,山东临沂273400;鲁南制药集团股份有限公司,山东临沂276000
文献出处：
引用格式：
[1]朱中松;赵丽丽;张贵民;曹宇;刘忠-.鼠源抗CD47单克隆抗体的筛选及活性评价)[J].中国医药工业杂志,2022(05):672-678
A类：
分子相互作用分析仪,3D8,moi,17nmol
B类：
CD47,单克隆抗体,活性评价,杂交瘤技术,技术筛选,选得,一株,白细胞分化抗原,聚乙二醇,脾细胞,SP2,细胞融合,酶联免疫吸附试验,杂交瘤细胞,Protein,亲和柱,十二烷基磺酸钠,SDS,聚丙烯酰胺凝胶电泳,PAGE,检测目的,目的蛋白,相对分子质量,生物分子,亲和力,调节蛋白,SIRP,藻红蛋白,PE,Raji,单抗,孵育,巨噬细胞,细胞吞噬,用血,血凝,红细胞凝集,实体瘤,肿瘤生长,生长作用,力常数,半数有效浓度,EC50,肿瘤细胞,生长抑制率,人源化,临床前研究,抗肿瘤活性
AB值：
0.284269
相似文献
机标中图分类号，由域田数据科技根据网络公开资料自动分析生成，仅供学习研究参考。
