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ATP柠檬酸裂解酶鼠源单克隆抗体的制备和鉴定
文献摘要：
目的:制备ATP柠檬酸裂解酶(ACLY)鼠源单克隆抗体(monoclonal antibody,McAb),并进行相关的特异性鉴定.方法:该研究采用原核表达的重组蛋白ACLY为抗原免疫6～8周龄Balb/c雌性小鼠,利用杂交瘤融合细胞技术构建稳定分泌ACLY McAb的杂交瘤细胞,用酶联免疫吸附测定(ELISA)、免疫荧光(IF)、Western-blot、免疫组织化学(IHC)、流式细胞术(FCM)等鉴定其生物活性,检测所得抗体的特异性.结果:复筛后获得了一株能稳定分泌ACLY McAb的杂交瘤细胞(5F8D11),Ig亚类为IgG1,轻链为κ链;Western-blot、IHC、IF分析和ELISA检测证实该株ACLY McAb与ACLY具有较高的特异性.结论:该株抗ACLY特异性的McAb的成功制备,为检测ACLY蛋白表达水平及研究ACLY在肿瘤及心血管疾病中的致病机制提供有力的工具,将有助于对肿瘤及心血管疾病患者制定多样合理的治疗方案.
文献关键词：
ATP柠檬酸裂解酶;单克隆抗体;免疫组织化学
中图分类号：
作者姓名：
李峰;谢潇;马宁;周文婷;田方艳
作者机构：
长沙医学院新型药物制剂研发湖南省重点实验室,湖南长沙410219;湖南远泰生物技术有限公司,湖南长沙410219
文献出处：
引用格式：
[1]李峰;谢潇;马宁;周文婷;田方艳-.ATP柠檬酸裂解酶鼠源单克隆抗体的制备和鉴定)[J].中国医院药学杂志,2022(16):1663-1667
A类：
5F8D11
B类：
ATP,柠檬酸,裂解酶,单克隆抗体的制备,ACLY,monoclonal,antibody,McAb,特异性鉴定,原核表达,重组蛋白,周龄,Balb,雌性小鼠,技术构建,杂交瘤细胞,酶联免疫吸附测定,免疫荧光,IF,blot,免疫组织化学,IHC,流式细胞术,FCM,复筛,一株,亚类,IgG1,轻链,蛋白表达水平,心血管疾病,致病机制
AB值：
0.25809
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