目的 探究miRNA-26a调控结缔组织生长因子对血管平滑肌细胞钙化的作用.方法 将细胞分为对照组、模型组、模型+AR234960组、AR234960+miR-26a mimic组和miR-26a mimic组.对照组细胞正常培养基培养,模型组VSMC细胞诱导钙化,模型+AR234960组的VSMC细胞诱导钙化后加入AR234960激动剂干预,AR234960+miR-26a mimic组的VSMC细胞诱导钙化后用AR234960激动剂和miR-26a mimic处理,miR-26a mimic组的VSMC细胞诱导钙化后转染miR-26a mimic.茜素红染色测定各组细胞钙化沉积;试剂盒检测各组细胞碱性磷酸酶(ALP)活性;荧光定量PCR和Western blot检测各组细胞miR-26a、OPG、OPN、BMP-2、CollagenⅡ基因和蛋白表达情况.双荧光素酶基因验证miR-26a与CTGF的结合.结果 平滑肌A7r5细胞钙化后,miR-26a的表达随着钙化时间的增加而降低(P<0.05),而CTGF的表达随钙化时间的增加而增加(P<0.05).茜素红染色结果显示,AR234960能够增加细胞的钙化程度,而miR-26a mimic能够减轻细胞钙化.与对照组相比,模型组ALP活性、OPN、BMP-2、CollagenⅡmRNA和蛋白的表达显著升高(P<0.05),OPG mRNA和蛋白的表达显著降低(P<0.05);与模型组相比,模型+AR234960组上述指标均无显著差异(P>0.05),而miR-26a mimic组ALP活性、OPN、BMP-2、CollagenⅡmRNA和蛋白的表达显著降低(P<0.05),OPG mRNA和蛋白的表达显著升高(P<0.05);与miR-26a mimic组相比,AR234960+miR-26a mimic组ALP活性、OPN、BMP-2、CollagenⅡmRNA和蛋白的表达显著升高(P<0.05),OPG mRNA和蛋白的表达显著降低(P<0.05).双荧光素酶基因检测结果显示,miR-26a-inhibitor组CTGF 3'-UTR野生型中相对荧光素酶活性较miR-26a-mimic组显著升高(P<0.05).结论 miRNA-26a能够有效降低细胞中ALP活性及OPN、BMP-2、CollagenⅡ的表达,同时增加钙化细胞中OPG水平,为miRNA-26a通过调控CTGF水平进而对缓解血管平滑肌细胞钙化提供了理论依据.

MiRNA-26a;结缔组织生长因子;血管钙化

吴伟;程龙;王杰;杨传蕾;尚玉强

华中科技大学同济医学院附属武汉中心医院心脏大血管外科,湖北 武汉430000

南方医科大学学报

[1]吴伟;程龙;王杰;杨传蕾;尚玉强-.MiRNA-26a通过调控结缔组织生长因子缓解血管平滑肌细胞的钙化)[J].南方医科大学学报,2022(09):1303-1308

+AR234960,AR234960+miR,AR234960

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