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粗糠柴毒素上调微小RNA-204-5p对脂多糖所致心肌损伤的保护机制研究
文献摘要：
目的 探讨粗糠柴毒素对脂多糖(LPS)所致心肌损伤的影响及其保护机制.方法 该研究自2018年9月至2019年4月,用终浓度为10 mg/L的LPS刺激HCM、AC16心肌细胞6 h,分别加入终浓度为0.5μmol/L、1.0μmol/L、1.5μmol/L、2.0μmol/L粗糠柴毒素(Rottlerin)再处理12 h后分别记为LPS+0.5μmol/L Rottlerin组、LPS+1.0μmol/L Rottlerin组、LPS+1.5μmol/L Rottler?in组、LPS+2.0μmol/L Rottlerin组,以单纯10 mg/L LPS处理的为LPS组,以未经粗糠柴毒素和LPS处理的为对照组.将模拟物阴性对照(miR-NC)、微小RNA-204-5p模拟物(miR-204-5p)、抑制剂阴性对照(anti-miR-NC)、miR-204-5p抑制剂(anti-miR-204-5p)分别转染至未经任何处理的HCM细胞中,记为miR-NC组、miR-204-5p组、anti-miR-NC组、anti-miR-204-5p组.将miR-NC,miR-204-5p转染至单纯10 mg/L LPS处理的HCM细胞中,记为LPS+miR-NC组,LPS+miR-204-5p组.将anti-miR-NC、anti-miR-204-5p、过表达空载体(pcDNA3.1)、高迁移率族蛋白B1(HMGB1)过表达载体(pcDNA3.1-HMGB1)转染至2.0μmol/L粗糠柴毒素和10 mg/L LPS处理HCM细胞中,记为LPS+Rottlerin+anti-miR-NC组、LPS+Rottlerin+anti-miR-204-5p组、LPS+Rottlerin+pcD?NA3.1组、LPS+Rottlerin+pcDNA3.1-HMGB1组.MTT法检测各组细胞增殖;流式细胞术检测细胞凋亡;实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测miR-204-5p和HMGB1 mRNA的表达水平;蛋白质印迹法检测蛋白表达;双荧光素酶报告基因检测实验检测荧光活性.结果 与对照组相比,LPS组心肌细胞HCM、AC16抑制率显著升高,HCM细胞中miR-204-5p(0.30±0.03比1.99±0.08)和B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)表达显著下降,Bax、HMGB1(1.04±0.10比0.26±0.02)表达和凋亡率[(27.79±2.23)％比(5.61±0.05)％]显著升高;相较于LPS组,LPS+0.5、1.0、1.5、2.0μmol/L Rottlerin组HCM、AC16细胞抑制率显著降低,HCM细胞中miR-204-5p(0.46±0.04、0.54±0.05、0.76±0.04、0.88±0.07比0.30±0.03)和Bcl-2表达显著升高,Bax、HMGB1(0.93±0.09、0.80±0.08、0.62±0.06、0.53±0.05比1.04±0.10)表达和凋亡率[(22.61±2.14)％、(20.06±1.94)％、(11.71±1.01)％、(9.16±1.00)％比(27.79±2.23)％]显著降低,呈浓度依赖型.与LPS+miR-NC组相比,LPS+miR-204-5p组HCM细胞中miR-204-5p(0.86±0.07比0.42±0.03)和Bcl-2表达升高,Bax表达及细胞抑制率和凋亡率[(15.76±1.32)％比(27.26±2.25)％]降低.miR-204-5p可靶向调控HMGB1;抑制miR-204-5p表达、过表达HMGB1均能逆转Rottlerin对LPS作用的心肌细胞HCM的保护作用.结论 粗糠柴毒素对LPS所致的心肌细胞损伤有保护作用,其机制主要是通过上调miR-204-5p表达,进而抑制HMGB1的表达发挥作用.
文献关键词：
野桐属植物;高迁移率族蛋白B1;粗糠柴毒素;微小RNA-204-5p;脂多糖;心肌损伤
中图分类号：
作者姓名：
于兆海;于悦
作者机构：
青岛市黄岛区人民医院药剂科,山东 青岛266400;山东第一医科大学公共管理学院公共事业管理专业,山东 泰安271000
文献出处：
引用格式：
[1]于兆海;于悦-.粗糠柴毒素上调微小RNA-204-5p对脂多糖所致心肌损伤的保护机制研究)[J].安徽医药,2022(12):2368-2374
A类：
粗糠柴毒素,Rottlerin,LPS+0,Rottler,LPS+Rottlerin+anti,LPS+Rottlerin+pcD,LPS+Rottlerin+pcDNA3,野桐属植物
B类：
5p,脂多糖,心肌损伤,保护机制,HCM,AC16,别加,再处理,别记,记为,LPS+1,LPS+2,NC,转染,LPS+miR,空载,高迁移率族蛋白,HMGB1,过表达载体,MTT,流式细胞术,逆转录聚合酶链反应,qRT,蛋白质印迹法,双荧光素酶报告基因,基因检测,实验检测,光活性,Bcl,Bax,凋亡率,细胞抑制率,依赖型,靶向调控,心肌细胞损伤
AB值：
0.12469
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