目的 研究miR-199b-5p调控HAPLN1对宫颈癌细胞顺铂耐药性的影响.方法 体外培养人宫颈癌细胞HeLa,通过逐步增加培养液中顺铂的浓度来诱导建立人宫颈癌顺铂耐药细胞株HeLa/DDP,通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)实验检测HeLa和HeLa/DDP中miR-199b-5p的表达水平;将HeLa/DDP细胞随机分为对照组、miR-199b-5p mimics组、顺铂+miR-199b-5p mimics阴性对照组、顺铂+miR-199b-5p mimics组,分组转染细胞后,通过CCK-8实验检测细胞增殖情况,计算其生存率;通过流式细胞实验检测细胞凋亡情况,计算其凋亡率;通过qRT-PCR实验测定细胞miR-199b-5p和HAPLN1、MDR1 mRNA水平;通过免疫印迹实验测定细胞HAPLN1和耐药蛋白P-gp的蛋白表达水平.结果 与HeLa细胞比较,miR-199b-5p在HeLa/DDP细胞中表达明显降低(P<0.05).与对照组比较,顺铂+miR-199b-5p mimics组细胞生存率明显降低,凋亡率明显升高,差异有统计学意义(P<0.05),miR-199b-5p mimics组、顺铂+miR-199b-5p mimics阴性对照组细胞生存率及凋亡率无明显改变,差异无统计学意义(P>0.05);与miR-199b-5p mimics组比较,顺铂+miR-199b-5p mimics组细胞生存率明显降低,凋亡率明显升高,差异有统计学意义(P<0.05),顺铂+miR-199b-5p mimics阴性对照组细胞生存率及凋亡率无明显改变,差异无统计学意义(P>0.05).与对照组比较,顺铂+miR-199b-5p mimics组、miR-199b-5p mimics组miR-199b-5p明显升高,HAPLN1及MDR1 mRNA水平、HAPLN1及P-gp蛋白水平明显降低,差异有统计学意义(P<0.05),顺铂+miR-199b-5p mimics阴性对照组细胞HAPLN1及MDR1 mRNA水平、HAPLN1及P-gp蛋白水平无明显改变,差异无统计学意义(P>0.05);与顺铂+miR-199b-5p mimics阴性对照组比较,miR-199b-5p mimics组和顺铂+miR-199b-5p mimics组细胞miR-199b-5p明显升高,HAPLN1及MDR1 mRNA水平、HAPLN1及P-gp蛋白水平明显降低,差异有统计学意义(P<0.05).结论 促进miR-199b-5p表达,可下调HAPLN1和耐药基因P-gp、MDR1表达,增强顺铂对人宫颈癌细胞的杀伤力,降低其顺铂耐药性.

miR-199b-5p;HAPLN1;宫颈癌;顺铂;耐药性

韩朝辉;龙静;刘洁玲;陈学;王静

571100 海南省海口市第三人民医院检验科;571100 海南省海口市第三人民医院妇产科

河北医药

[1]韩朝辉;龙静;刘洁玲;陈学;王静-.miR-199 b-5p调控HAPLN1对宫颈癌细胞顺铂耐药性的影响)[J].河北医药,2022(19):2896-2901

HAPLN1

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