典型文献
基于iTRAQ技术探讨人胃癌细胞乙酰肝素酶调控的信号通路
文献摘要:
目的:探讨人胃癌细胞中乙酰肝素酶(HPSE)调控的差异蛋白和信号通路,为以HPSE为靶点防治胃癌提供依据.方法:利用siRNA干扰技术,在乙酰肝素酶(HPSE)基因高表达的SGC7901细胞中转入干扰HPSE的慢病毒载体(LV-HPSE-RNAi),通过嘌呤霉素筛选出稳定株,利用qPCR和Western blot分别检测HPSE mRNA和蛋白表达;利用细胞划痕实验和Transwell侵袭实验测定细胞的迁移和侵袭能力;利用同位素标记的相对和绝对定量(iTRAQ)联合二维液相色谱串联质谱(2DLC-MS/MS)技术筛查差异蛋白,并进行生物信息学分析,对差异蛋白PKCa应用Western blot进一步验证.结果:人胃癌SGC7901细胞和沉默HPSE表达的ZSGC7901细胞对比检测出98个差异蛋白,并且富集在157条信号通路上.与肿瘤发生发展关系密切的有6条:细胞外基质和受体相互作用、局灶性黏附、PI3K-Akt信号通路、癌途径、癌中microRNAs、Wnt信号通路.且上调的FAK、ITGA、PKCa等蛋白和下调的PKA、CDK6等蛋白在通路中处于重要的位置.Western blot结果证明PKCa在沉默HPSE的ZSGC7901细胞中表现为上调,差异具有统计学意义(P<0.05),与蛋白质组学筛选结果一致.结论:HPSE在人胃癌细胞中调控的蛋白,参与细胞重要生物学过程、参与重要分子功能及重要信号途径,有望可以成为防治胃癌的新靶点.
文献关键词:
胃癌;乙酰肝素酶;同位素标记的相对和绝对定量
中图分类号:
作者姓名:
李方舒;黄萨础拉;马秀梅;杜华
作者机构:
内蒙古医科大学基础医学院,内蒙古 呼和浩特 010000;内蒙古医科大学附属医院妇产科,内蒙古 呼和浩特 010000;内蒙古医科大学病理学教研室,内蒙古 呼和浩特 010000
文献出处:
引用格式:
[1]李方舒;黄萨础拉;马秀梅;杜华-.基于iTRAQ技术探讨人胃癌细胞乙酰肝素酶调控的信号通路)[J].现代肿瘤医学,2022(22):4071-4077
A类:
同位素标记的相对和绝对定量,2DLC,PKCa,ZSGC7901,ITGA
B类:
iTRAQ,技术探讨,胃癌细胞,乙酰肝素酶,HPSE,差异蛋白,siRNA,干扰技术,转入,慢病毒载体,LV,RNAi,嘌呤霉素,稳定株,qPCR,blot,细胞划痕实验,Transwell,实验测定,迁移和侵袭,侵袭能力,二维液相色谱,液相色谱串联质谱,生物信息学分析,对比检测,肿瘤发生发展,发展关系,细胞外基质,局灶性,PI3K,Akt,microRNAs,Wnt,FAK,PKA,CDK6,蛋白质组学,生物学过程,信号途径,新靶点
AB值:
0.253561
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