目的 探讨食管癌组织中KAT2A与Survivin蛋白乙酰化相关性及下调KAT2A对食管癌细胞Survivin乙酰化、Wnt/β-catenin通路及功能的影响.方法 免疫共沉淀实验(Co-IP)检测蛋白乙酰化,免疫组化及Western blot法检测蛋白的表达.生物信息学预测乙酰基转移酶以Survivin为底物发生乙酰化的关系,免疫荧光验证蛋白在癌组织中的定位及表达;构建合成KAT2A小干扰RNA序列,脂质体介导法转染食管癌细胞,qRT-PCR检测mRNA的相对表达量,应用MTT、划痕愈合和Tran-swell小室实验检测细胞存活率、迁移和侵袭能力.结果 免疫组化结果显示,食管癌组织中Survivin蛋白阳性率为71.11％(32/45),高于正常食管黏膜组织的28.89％(13/45);癌组织和正常食管黏膜组织中KAT2A蛋白阳性率分别为75.56％(34/45)和24.44％(11/45),差异有统计学意义(P<0.05).Western blot结果显示,Survivin在癌组织中表达为(74.35±3.43)％,高于正常食管黏膜组织(22.62±2.48)％;KAT2A在癌组织中表达为(70.68±3.15)％,高于正常食管黏膜组织(23.87±2.67)％,差异有统计学意义(P<0.05).食管癌组织中Survivin蛋白发生了乙酰化,其乙酰化率为(66.48±3.14)％,高于正常食管黏膜组织的(17.31±2.42)％,差异有统计学意义(P<0.05).生物信息学预测显示:乙酰基转移酶KAT2A可以催化Survivin为底物发生乙酰化,且免疫荧光证实Survivin和KAT2A蛋白在癌组织中同时呈高表达,两者主要表达于细胞质中,部分表达于细胞核中;食管癌组织中Survivin乙酰化和KAT2A表达呈正相关(r=0.326,P=0.025);体外实验结果显示,KAT2A在食管癌EC109细胞中的阳性率为(87.36±4.24)％,高于正常食管上皮HEEC细胞的(17.45±2.78)％.食管癌EC109细胞内Survivin蛋白乙酰化水平为(87.79±4.12)％,显著高于正常食管上皮HEEC细胞中的(21.28±3.78)％.下调KAT2A后食管癌细胞内Survivin乙酰化水平显著下降,同时wnt3α、β-catenin和c-myc蛋白表达量下降,且抑制了细胞存活、迁移和侵袭能力.结论 食管癌病变过程中乙酰基转移酶KAT2A高表达与Survivin蛋白乙酰化修饰具有相关性;KAT2A下调可使Survivin发生去乙酰化,并通过阻断Wnt/β-catenin信号通路影响食管癌细胞的功能.

食管肿瘤;KAT2A;Survivin;乙酰化修饰;Wnt/β-catenin信号通路

梁宗英;杨阳;孙光蕊;郑竞雄;赵宝山;侯继申

承德医学院附属医院胸外科,承德 067000;河北省胸科医院临床实验室,石家庄 050000

临床与实验病理学杂志

[1]梁宗英;杨阳;孙光蕊;郑竞雄;赵宝山;侯继申-.KAT2A通过Survivin乙酰化抑制Wnt/β-catenin通路调控食管癌的机制)[J].临床与实验病理学杂志,2022(12):1432-1438

KAT2A

Survivin,Wnt,catenin,食管癌组织,食管癌细胞,免疫共沉淀,Co,免疫组化,blot,乙酰基转移酶,底物,免疫荧光,小干扰,脂质体,转染,qRT,相对表达量,MTT,划痕,Tran,swell,小室,实验检测,细胞存活率,迁移和侵袭,侵袭能力,白阳,食管黏膜,组织中表达,白发,细胞质,细胞核,体外实验,EC109,HEEC,wnt3,myc,癌病,乙酰化修饰,去乙酰化,食管肿瘤

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