目的:探讨微小RNA(miRNA，miR)-598-3p靶向调控RNA聚合酶Ⅱ第五亚基调节蛋白(RMP)基因对人胃癌细胞SGC-7901恶性增殖和侵袭迁移的影响及其作用机制。方法:筛选SGC-7901细胞株行后续实验，分别建立稳定过表达或敲减RMP和miR-598-3p的SGC-7901细胞株。采用溴脱氧尿苷(BrdU)、细胞计数试剂盒(CCK-8)检测细胞增殖活力，平板克隆形成实验检测细胞集落形成能力，划痕实验检测细胞迁移能力，Transwell实验检测细胞侵袭能力，双荧光素酶报告基因法分析miR-598-3p的结合靶点，蛋白质印迹法(Western blot)检测相关通路相关蛋白表达水平，两样本间比较使用 t检验。 结果:稳定过表达和敲减RMP或miR-598-3p的SGC-7901细胞株建立成功。敲减RMP能显著降低SGC-7901的增殖能力，BrdU(8.867±1.159比26.030±3.630， t＝7.704， P<0.01)，CCK-8(0.560±0.052比1.020±0.107， t＝6.708， P<0.01)，迁移能力(336.000±21.070比252.700±36.120， t＝3.452， P<0.05)，侵袭能力(36.330±7.371比127.300±10.690， t＝12.140， P<0.01)。过表达RMP能显著提高SGC-7901细胞的增殖能力，BrdU(56.400±6.560比24.800±4.423， t＝6.918， P<0.01)，CCK-8(2.105±0.142比1.028±0.110， t＝10.350， P<0.01)，迁移能力(131.300±20.110比257.000±29.140， t＝6.148， P<0.01)，侵袭能力(347.700±41.140比135.000±17.690， t＝8.226， P<0.01)。生物信息学预测miR-598-3p与RMP的3’端非编码区(3’UTR)位点结合，并通过双荧光素报告系统验证。过表达或敲减miR-598-3p能分别降低和提高SGC-7901细胞株的增殖、迁移及侵袭能力，而RMP的回复表达能挽救miR-598-3p引起的细胞增殖、侵袭及迁移的抑制。miR-598-3p通过靶向RMP抑制p70核糖体蛋白S6激酶(p70s6k1)/凋亡蛋白(Bad)和核因子-κB(NF-κB)通路发挥功能。 结论:miR-598-3p靶向RMP基因抑制p70s6k1/Bad和NF-κB通路降低SGC-7901细胞的增殖、集落形成、迁移及侵袭能力。

微小RNA;胃癌;RNA聚合酶Ⅱ第五亚基调节蛋白

苏州大学附属第三医院肿瘤生物诊疗中心　江苏省肿瘤免疫治疗工程技术研究中心　苏州大学细胞治疗研究院，常州　213003;苏州大学附属第三医院医学检验科，常州　213003

[1]王琦;周围;蒋敬庭-.微小RNA-598-3p靶向调控RNA聚合酶Ⅱ第五亚基调节蛋白基因抑制胃癌细胞增殖和侵袭迁移的实验研究)[J].中华实验外科杂志,2022(07):1291-1295

p70s6k1

3p,靶向调控,亚基,基调,调节蛋白,基因抑制,胃癌细胞,细胞增殖和侵袭,侵袭迁移,miRNA,RMP,SGC,恶性增殖,细胞株,过表达,敲减,脱氧尿苷,BrdU,试剂盒,CCK,细胞增殖活力,克隆形成,实验检测,集落形成,形成能,划痕实验,细胞迁移能力,Transwell,细胞侵袭能力,双荧光素酶报告基因,报告基因法,蛋白质印迹法,blot,相关通路,蛋白表达水平,两样,立成,细胞的增殖,非编码区,UTR,报告系统,系统验证,迁移及侵袭,回复,挽救,核糖体蛋白,S6,凋亡蛋白,Bad,核因子

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