典型文献
北京油鸡角膜缘干细胞分离培养及分化潜能研究
文献摘要：
[目的]研究北京油鸡角膜缘干细胞(LSCs)分离、培养、鉴定及多向分化潜能等生物学特性.[方法]取10胚龄健康北京油鸡鸡胚的角膜缘,采用分散酶Ⅱ(dispase Ⅱ)联合胰蛋白酶二步法分离细胞,进行体外培养,绘制生长曲线,通过免疫荧光和RT-PCR技术鉴定LSCs特异性标志物细胞角蛋白3(CK3)、CK12、细胞周期调控蛋白p63、ATP结合盒转运蛋白(ABCG2)和细胞角蛋白19(CK19)的表达;通过成骨和成软骨诱导检测其多向分化潜能.[结果]获得的北京油鸡细胞折光性强、贴壁后呈多角形,生长曲线呈典型的S型,群体倍增时间(PDT)随着代次的升高逐渐下降;免疫荧光检测结果表明,分离的细胞中ABCG2、p63和CK19均呈阳性表达,CK3和CK12不表达;RT-PCR检测结果表明,分离的细胞表达p63、CK19、ABCG2,不表达CD45,说明分离的细胞为LSCs.LCSs成骨诱导分化后,可见被茜素红染色的矿化钙结节,RT-PCR检测结果表明其表达成骨关键基因骨桥蛋白(OPN)和Ⅰ 型胶原蛋白(Col-Ⅰ);成软骨诱导分化后,可见被阿利新蓝染色的软骨组织,RT-PCR检测结果表明其表达成软骨细胞关键基因转录因子性别决定区Y框9(SOX-9)和Ⅱ型胶原蛋白(Col-Ⅱ).[结论]本研究成功从10胚龄北京油鸡胚胎角膜缘中分离LSCs,且其具有良好的增殖活力及成骨和成软骨能力,结果可为禽类LSCs的资源保存研究提供参考.
文献关键词：
北京油鸡;角膜缘干细胞;生物学特性;诱导分化
中图分类号：
作者姓名：
高也凡;宋哈楠;王育南;吴月;牛锐利;宗宪春;关伟军
作者机构：
中国农业科学院北京畜牧兽医研究所,北京100193;佳木斯大学,佳木斯154007;牡丹江师范学院生命科学与技术学院,牡丹江157011
文献出处：
引用格式：
[1]高也凡;宋哈楠;王育南;吴月;牛锐利;宗宪春;关伟军-.北京油鸡角膜缘干细胞分离培养及分化潜能研究)[J].中国畜牧兽医,2022(09):3372-3381
A类：
分散酶,dispase,CK12,LCSs
B类：
北京油鸡,角膜缘干细胞,细胞分离,分离培养,分化潜能,LSCs,多向分化,生物学特性,健康北京,鸡鸡,胰蛋白酶,二步法,体外培养,生长曲线,技术鉴定,细胞角蛋白,CK3,细胞周期,周期调控,调控蛋白,p63,ATP,转运蛋白,ABCG2,CK19,成软骨,折光,贴壁,多角形,倍增时间,PDT,免疫荧光检测,阳性表达,CD45,成骨诱导分化,茜素红,矿化,化钙,关键基因,骨桥蛋白,OPN,胶原蛋白,Col,阿利新蓝染色,软骨组织,软骨细胞,基因转录,性别决定,SOX,鸡胚胎,增殖活力,禽类,资源保存
AB值：
0.297506
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