目的 探究MicroRNA-4516(miR-4516)、MicroRNA-198(miR-198)在视网膜母细胞瘤(RB)Y79细胞中的表达及其临床意义.方法 收集2018年3月至2021年3月行眼球摘除术治疗的35例RB患儿的肿瘤组织及30例正常视网膜组织标本,比较肿瘤组织、正常视网膜组织和Y79细胞中miR-4516、miR-198的表达水平.脂质体转染法建立miR-4516、miR-198过表达组(miR-4516-mimics组、miR-198-mimics组)、抑制组(miR-4516-inhibitor组、miR-198-inhibitor组)和对照组(miR-4516-NC组、miR-198-NC组).CCK-8法检测转染24 h、48 h和72 h后各组细胞的增殖活性;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测转染48 h后各组细胞miR-4516、miR-198表达水平;流式细胞术检测各组细胞凋亡率;Western blot法检测各组细胞P53、Bcl-2蛋白表达.结果 肿瘤组织及Y79细胞中miR-4516的表达水平均高于正常视网膜组织,miR-198则相反,差异均有统计学意义(均为P<0.05).细胞转染48 h后,miR-4516、miR-198分别在各自的inhibitor组、NC组和mimics组细胞内相对表达量逐渐升高(均为P<0.05).转染后24 h、48 h、72 h,各组细胞增殖活性均逐渐升高,差异均有统计学意义(均为P<0.05),且同一时间点各组的细胞增殖活性比较,miR-4516-mimics组>miR-4516-NC组>miR-4516-inhibitor组,miR-198-inhibitor组>miR-198-NC组>miR-198-mimics组,差异均有统计学意义(均为P<0.05).转染后48 h,各组细胞凋亡率比较,miR-4516-inhibitor组>miR-4516-NC组>miR-4516-mimics组,miR-198-mimics组>miR-198-NC组>miR-198-inhibi-tor组,差异均有统计学意义(均为P<0.05).P53蛋白在miR-4516-mimics组、miR-4516-NC组和miR-4516-inhibitor组中表达逐渐升高,Bcl-2蛋白表达逐渐降低,差异均有统计学意义(均为P<0.05);P53蛋白在miR-198-mimics组、miR-198-NC组、miR-198-inhibitor组中表达逐渐降低,Bcl-2蛋白表达逐渐升高,差异均有统计学意义(均为P<0.05).结论 miR-4516在RB肿瘤组织及Y79细胞中呈高表达状态,miR-198呈低表达状态;miR-4516可促进Y79细胞增殖,抑制其凋亡,miR-198可抑制Y79细胞增殖,二者有望成为RB的新的肿瘤标志物.

视网膜母细胞瘤;MicroRNA-4516;MicroRNA-198;细胞增殖;凋亡

李萍;卢跃兵;孙爽;刘婷;孙先桃;余继锋

450000 河南省郑州市,郑州大学附属儿童医院 河南省儿童医院 郑州儿童医院眼科;100045 北京市,首都医科大学附属北京儿童医院眼科 国家儿童医学中心

眼科新进展

[1]李萍;卢跃兵;孙爽;刘婷;孙先桃;余继锋-.MicroRNA-4516、MicroRNA-198在视网膜母细胞瘤Y79细胞中的表达及其意义)[J].眼科新进展,2022(03):200-204

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