典型文献
骨髓间充质干细胞条件培养基对人自发永生化Müller细胞系增生、黏附和分化的促进作用
文献摘要：
目的:探讨骨髓间充质干细胞(BMSCs)来源的条件培养基对人永生化Müller细胞系MIO-M1细胞增生、黏附和分化的作用。方法:BMSCs传至第3代进行成骨、成软骨及成脂诱导培养基诱导分化，并分别使用茜素红、阿利辛蓝及油红O染色进行分化鉴定；采用流式细胞仪检测细胞中间充质干细胞标志物CD73、CD90和CD105以及造血干细胞标志物CD34、CD45和人类白细胞DR抗原(HLA-DR)表达。采用免疫荧光染色法检测MIO-M1细胞中Müller细胞标志物SOX9、谷氨酰胺合成酶(GS)、vimentin和胞内视黄醛结合蛋白(CRALBP)，视网膜干细胞标志物SOX2、nestin和CHX10，以及细胞增生标志物细胞周期蛋白D3(CCND3)的表达。将MIO-M1细胞分为标准培养基组、293T条件培养基组和BMSC条件培养基组，分别在标准培养基、293T培养上清液和BMSC培养上清液中培养。定量分析各组细胞面积、圆度、伸长系数、周长等形态参数；采用流式细胞仪检测细胞周期，采用成球实验和5-乙炔基-2'脱氧尿嘧啶核苷(EdU)染色法检测细胞增生情况。采用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测各组培养上清液中血管细胞黏附分子1(VCAM-1)的表达；采用荧光定量PCR法检测各组细胞中VCAM-1 mRNA表达。采用免疫荧光染色法和荧光定量PCR法分别检测各组细胞诱导分化培养后视网膜神经元标志物蛋白激酶C(PKCα)、Rhodopsin、微管相关蛋白2(MAP2)和β-微管蛋白(Tuj1)的表达变化。结果:培养的BMSCs高表达CD73、CD90和CD105，低表达CD34、CD45和HLA-DR，并可成功诱导分化为成骨细胞、软骨细胞和脂肪细胞。MIO-M1细胞表达SOX9、GS、vimentin、CRALBP、SOX2、CHX10、nestin和CCND3。与标准培养基和293T条件培养基组比较，BMSC条件培养基组的MIO-M1细胞形态发生改变，形成细长的纺锤形或多极形态，且细胞面积减少，伸长系数增加，圆度降低，差异均有统计学意义(
F＝6.973、12.370、6.311，均
P<0.01)；与标准培养基和293T条件培养基组比较，不同时间点BMSC条件培养基组MIO-M1细胞形成的神经球面积明显增大，差异均有统计学意义(
F组别＝134.300，
P＝<0.001；
F时间＝82.910，
P<0.001)；与标准培养基和293T条件培养基组比较，BMSC条件培养基组MIO-M1细胞的EdU阳性率和细胞增生指数均显著提高，差异均有统计学意义(
F＝6.973、74.110，均
P<0.05)；与标准培养基和293T条件培养基组比较，BMSC条件培养基组的细胞上清液中VCAM-1蛋白质量浓度和细胞中的VCAM-1 mRNA相对表达量均显著升高，差异均有统计学意义(
F＝13.720、7.896，均
P<0.05)；MIO-M1细胞在分化条件下，BMSC条件培养基组的MIO-M1细胞在mRNA水平的PKCα、Rhodopsin、Tuj1和MAP2相对表达量较标准培养基组和293T条件培养基组均明显升高，差异均有统计学意义(
F＝14.490、5.424、14.330、7.405，均
P<0.05)。
结论:BMSC条件培养基可以改变Müller细胞的形态，并促进其增生、黏附和向视网膜神经元的分化。
文献关键词：
骨髓间充质干细胞;干细胞;细胞增生;细胞分化;Müller细胞
中图分类号：
作者姓名：
葛玲玲;李沂键;黎其友;古贤梁;黄小娜;陶醉;徐海伟
作者机构：
陆军军医大学第一附属医院眼科 视觉损伤与再生修复重庆市重点实验室，重庆 400038
文献出处：
引用格式：
[1]葛玲玲;李沂键;黎其友;古贤梁;黄小娜;陶醉;徐海伟-.骨髓间充质干细胞条件培养基对人自发永生化Müller细胞系增生、黏附和分化的促进作用)[J].中华实验眼科杂志,2022(03):199-209
A类：
MIO,CRALBP,CHX10,Rhodopsin
B类：
骨髓间充质干细胞,间充质干细胞条件培养基,永生化,ller,细胞系,附和,BMSCs,M1,细胞增生,成软骨,成脂,诱导培养基,诱导分化,茜素红,阿利,利辛,流式细胞仪,干细胞标志物,CD73,CD90,CD105,造血干细胞,CD34,CD45,DR,HLA,免疫荧光染色法,SOX9,谷氨酰胺合成酶,GS,vimentin,内视,视黄醛,结合蛋白,视网膜,SOX2,nestin,细胞周期蛋白,CCND3,基组,293T,养上,上清液,圆度,伸长,周长,形态参数,成球实验,乙炔基,脱氧,尿嘧啶,EdU,酶联免疫吸附测定,组培,血管细胞黏附分子,VCAM,细胞诱导,分化培养,后视,蛋白激酶,PKC,MAP2,微管蛋白,Tuj1,表达变化,低表达,成骨细胞,软骨细胞,脂肪细胞,细胞形态,形态发生,细长,纺锤形,多极,不同时间点,神经球,球面,组别,相对表达量,细胞分化
AB值：
0.237744
相似文献
机标中图分类号，由域田数据科技根据网络公开资料自动分析生成，仅供学习研究参考。
