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视网膜色素上皮细胞通过分泌含有miR-4488的外泌体抑制糖尿病视网膜病变进展的机制研究
文献摘要：
目的 探讨视网膜色素上皮细胞通过分泌含有miR-4488的外泌体抑制糖尿病视网膜病变进展的分子机制.方法 将人视网膜色素上皮细胞系ARPE-19细胞分为空白组、高糖组.将人视网膜微血管内皮细胞(HRMECs)分为NG组、HG组、NG+外泌体组和HG+外泌体组.空白组、NG组和NG+外泌体组细胞用含5.5 mmol·L-1正常浓度葡萄糖的培养基培养24 h;高糖组、HG组和HG+外泌体组细胞用含30 mmol·L-1高浓度葡萄糖的培养基培养24 h;NG+外泌体组和HG+外泌体组细胞在培养基中分别加入空白组或高糖组ARPE-19细胞分泌的外泌体40μg·L-1.PKH67绿色荧光标记外泌体;利用CCK-8法、Transwell小室法检测HRMECs增殖、迁移和血管生成.取空白组和高糖组ARPE-19细胞外泌体进行miRNA微阵列分析.采用双荧光素酶报告分析检测miR-4488和转化生长因子β受体Ⅱ(TGFβR2)基因序列的靶向关系.采用Western blot或免疫荧光染色检测各组HRMECs中TGFβR2、Smad2、p-Smad2ser467或Desmin、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达.结果 空白组和高糖组ARPE-19细胞分泌的被PKH67标记的外泌体加入培养基后都可被HRMECs吸收.与NG组相比,HG组HRMECs细胞增殖率、迁移率、血管结点数和血管总长度、TGFβR2和p-Smad2ser467蛋白表达量、Desmin和α-SMA蛋白荧光强度均增加(均为P<0.05);与HG组相比,HG+外泌体组上述指标均被逆转(均为P<0.05);NG+外泌体组与NG组上述指标相比差异均无统计学意义(均为P>0.05).与空白组相比,高糖组ARPE-19细胞分泌的外泌体中miR-4488相对表达量增加,且miR-4488模拟物和TGFβR2wt共转染可增加双荧光素酶活性(均为P<0.05).结论 在高糖条件下,ARPE-19细胞释放的外泌体可通过miR-4488/TGFβR2/Smad信号通路抑制HRMECs间充质转化.
文献关键词：
miR-4488;转化生长因子β;糖尿病视网膜病变;内皮细胞间充质转化;外泌体;视网膜色素上皮细胞
中图分类号：
作者姓名：
令狐绍容;罗泓扬
作者机构：
563000 贵州省遵义市,遵义医科大学附属医院眼科中心;563000 贵州省遵义市,遵义医科大学附属医院眼科临床技能实验室
文献出处：
引用格式：
[1]令狐绍容;罗泓扬-.视网膜色素上皮细胞通过分泌含有miR-4488的外泌体抑制糖尿病视网膜病变进展的机制研究)[J].眼科新进展,2022(05):353-358
A类：
NG+,Smad2ser467,R2wt,内皮细胞间充质转化
B类：
制糖,糖尿病视网膜病变,病变进展,人视网膜色素上皮细胞,细胞系,ARPE,人视网膜微血管内皮细胞,HRMECs,HG+,高浓度葡萄糖,别加,PKH67,荧光标记,CCK,Transwell,小室,血管生成,细胞外泌体,miRNA,微阵列分析,双荧光素酶报告分析,分析检测,转化生长因子,TGF,基因序列,blot,免疫荧光染色,Desmin,平滑肌肌动蛋白,SMA,细胞增殖率,迁移率,结点,总长度,荧光强度,相对表达量,共转染,荧光素酶活性,高糖条件,细胞释放
AB值：
0.170435
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