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典型文献
杨梅苷对高糖环境下视网膜微血管内皮细胞的保护作用及其调控机制
文献摘要:
目的:探讨杨梅苷对高糖诱导视网膜微血管内皮细胞(HRMECs)损伤的抑制作用及其调控机制。方法:将HRMECs分为正常对照组、高糖组及12.5 μg/ml、25.0 μg/ml、50.0 μg/ml杨梅苷组,其中杨梅苷组细胞在含杨梅苷的高糖培养基中培养24 h。分别采用pcDNA和pcDNA-circZNF292转染HRMECs后使用含25 mmol/L D-葡萄糖的高糖培养基培养24 h,作为pcDNA组和pcDNA-circZNF292组。分别采用siR-NC和siR-circZNF292转染至HRMECs后加入含50.0 μg/ml杨梅苷和25 mmol/L D-葡萄糖的培养基中培养24 h,作为杨梅苷+siR-NC组和杨梅苷+siR-circZNF292组。采用流式细胞术检测细胞凋亡率;利用酶联免疫吸附测定试剂盒检测细胞中丙二醛(MDA)浓度和超氧化物歧化酶(SOD)活性;采用实时荧光定量PCR法检测circZNF292和miR-23b-3p的基因表达量;采用双荧光素酶报告实验检测circZNF292与miR-23b-3p的靶向关系;采用Western blot法检测B细胞淋巴瘤-2(bcl-2)和bcl-2相关蛋白(bax)蛋白表达量。结果:正常对照组、高糖组及12.5 μg/ml、25.0 μg/ml、50.0 μg/ml杨梅苷组细胞bax和bcl-2蛋白相对表达量、细胞凋亡率、MDA浓度、SOD活性值以及circZNF292和miR-23b-3p相对表达量总体比较,差异均有统计学意义( F=105.707、111.835、74.515、109.651、135.020、219.919、116.304,均 P<0.001)。随着杨梅苷剂量的逐渐增加,细胞中bax蛋白相对表达量、细胞凋亡率、MDA浓度和miR-23b-3p相对表达量逐渐下降,bcl-2蛋白相对表达量、SOD活性值和circZNF292相对表达量逐渐升高,不同剂量杨梅苷组间比较差异均有统计学意义(均 P<0.05)。共转染野生型载体WT-circZNF292细胞中,miR-23b-3p组细胞中相对荧光素酶活性值为0.35±0.03,低于miR-NC组的0.96±0.09,差异有统计学意义( t=11.137, P<0.001)。与pcDNA组比较,pcDNA-circZNF292组细胞中circZNF292相对表达量、bcl-2蛋白相对表达量和MDA浓度明显升高,miR-23b-3p相对表达量、bax蛋白相对表达量、细胞凋亡率和SOD活性值明显下降,差异均有统计学意义(均 P<0.05)。与高糖组和杨梅苷+siR-circZNF292组比较,杨梅苷组和杨梅苷+siR-NC组miR-23b-3p、bax蛋白相对表达量、细胞凋亡率和MDA浓度明显降低,circZNF292、bcl-2蛋白相对表达量和SOD活性值明显升高,差异均有统计学意义(均 P<0.05)。 结论:杨梅苷可通过调控circZNF292/miR-23b-3p表达而抑制HRMECs凋亡及氧化应激损伤,从而减轻高糖诱导的HRMECs损伤。
文献关键词:
杨梅苷;细胞凋亡;氧化应激;人视网膜微血管内皮细胞;circZNF292;miR-23b-3p
作者姓名:
刘茜;刘长庚;李海军;董仰曾;张颖
作者机构:
河南省人民医院眼科 郑州大学人民医院眼科 河南省立眼科医院 河南省眼科研究所,郑州 450003
引用格式:
[1]刘茜;刘长庚;李海军;董仰曾;张颖-.杨梅苷对高糖环境下视网膜微血管内皮细胞的保护作用及其调控机制)[J].中华实验眼科杂志,2022(07):623-631
A类:
circZNF292,+siR
B类:
杨梅苷,高糖环境,调控机制,高糖诱导,导视,HRMECs,正常对照,ml,pcDNA,NC,流式细胞术,细胞凋亡率,酶联免疫吸附测定,试剂盒,miR,23b,3p,基因表达量,双荧光素酶报告实验,实验检测,blot,细胞淋巴瘤,bcl,bax,白相,相对表达量,不同剂量,共转染,野生型,WT,荧光素酶活性,氧化应激损伤,人视网膜微血管内皮细胞
AB值:
0.100705
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