典型文献
草鱼C5a、C5aR和FⅡ多克隆抗体的制备与表达特性
文献摘要：
为研究草鱼补体蛋白5a(complement component 5a,C5a)、补体蛋白5a受体(C5a receptor,C5aR)和凝血因子Ⅱ(blood coagulation factorⅡ,FⅡ)在感染草鱼呼肠孤病毒(grass carp reovirus,GCRV)时的蛋白表达和相互作用,针对草鱼C5a和FⅡ蛋白构建了原核表达体系、针对草鱼C5aR蛋白构建C5aR-KLH偶联物,纯化蛋白,免疫日本大耳白兔制备3种蛋白的多克隆抗体.用蛋白质印迹(Western blot)、免疫共沉淀(Co-IP)和拉下(pull down)实验检测3种蛋白表达与互作关系,Western blot结果显示,C5a和C5aR在健康草鱼的肝脏、脾脏、肾脏、头肾、肠、鳃和肌肉中均有蛋白表达,FⅡ在肝脏、脾脏和肠中表达,而在肾脏、头肾、鳃和肌肉中不表达;在感染GCRV的草鱼肝脏组织中C5a、C5aR和FⅡ蛋白均随病程进展呈现上升趋势.Co-IP结果显示,在GCRV处理后,C5a、C5aR和FⅡ蛋白具有相互作用关系.pull down结果显示,C5a pull down共鉴定得到C3、RIG-I等28种候选蛋白,C5aR pull down共鉴定得到转醛醇酶、巨球蛋白等24种候选蛋白.该研究为深入探讨C5a、C5aR和FⅡ互作调控关系以及进一步探索补体和凝血级联系统中3个关联蛋白响应GCRV感染的作用机制奠定了基础.
文献关键词：
草鱼;C5a;C5aR;FⅡ;多克隆抗体;草鱼呼肠孤病毒(GCRV);表达特性
中图分类号：
作者姓名：
苏杭;肖调义;许宝红;刘巧林;吕丽刚;刘益
作者机构：
湖南农业大学,湖南省特色水产资源利用工程技术研究中心,湖南 长沙 410128
文献出处：
引用格式：
[1]苏杭;肖调义;许宝红;刘巧林;吕丽刚;刘益-.草鱼C5a、C5aR和FⅡ多克隆抗体的制备与表达特性)[J].水产学报,2022(05):785-796
A类：
转醛醇酶
B类：
C5aR,多克隆抗体,表达特性,补体蛋白,complement,component,receptor,凝血因子,blood,coagulation,草鱼呼肠孤病毒,grass,carp,reovirus,GCRV,原核表达,表达体系,KLH,偶联物,日本大耳白兔,种蛋,蛋白质印迹,blot,免疫共沉淀,Co,拉下,pull,down,实验检测,互作关系,脾脏,头肾,鱼肝,肝脏组织,病程进展,相互作用关系,C3,RIG,巨球蛋白,级联系统
AB值：
0.280132
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