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微载体规模化培养草鱼鳔细胞以增殖Ⅱ型草鱼呼肠孤病毒的工艺研究
文献摘要：
为优化草鱼(Ctenopharyngodon idella)鳔细胞(CiSB)细胞悬浮培养工艺,以提高基因Ⅱ型草鱼呼肠孤病毒(grass carp reovirus,GCRV)含量,利用Cytodex 1微载体悬浮培养系统规模化培养CiSB和Ⅱ型GCRV,对CiSB细胞初始接种密度、搅拌转速和微载体浓度等工艺参数进行摸索和优化.结果显示,在CiSB细胞贴壁期,以转速30 r·min-1、每静置30 min搅拌2 min的间歇搅拌方式培养最佳,4 h后细胞贴附率可达96％以上;在微载体密度2 g·L-1、细胞初始接种密度2×105个·mL-1、搅拌速度30 r·min-1的条件下,初始培养血清浓度设定为10％,培养3 d后更换50％的培养基并使血清浓度达到5％,可获得最佳的细胞生长效能.CiSB经消化转移放大至1 L,微载体上细胞贴附均匀、生长良好.接种Ⅱ型GCRV至规模化培养的CiSB细胞,拷贝数最高达6.2×105拷贝数·μL-1.研究结果可为草鱼出血病疫苗的规模化生产工艺研究提供依据.
文献关键词：
草鱼鳔细胞(CiSB);Ⅱ型草鱼呼肠孤病毒;微载体培养;工艺优化
中图分类号：
作者姓名：
杨玉茹;王英英;王庆;周文礼;尹纪元;石存斌
作者机构：
天津农学院水产学院,天津 300384;中国水产科学研究院珠江水产研究所,农业农村部渔药创制重点实验室,广东省水产动物免疫与绿色养殖重点实验室,广州 510380
文献出处：
引用格式：
[1]杨玉茹;王英英;王庆;周文礼;尹纪元;石存斌-.微载体规模化培养草鱼鳔细胞以增殖Ⅱ型草鱼呼肠孤病毒的工艺研究)[J].海洋渔业,2022(05):577-588
A类：
CiSB,载体密度
B类：
规模化培养,养草,鱼鳔,草鱼呼肠孤病毒,Ctenopharyngodon,idella,细胞悬浮培养,grass,carp,reovirus,GCRV,Cytodex,培养系统,接种密度,搅拌转速,贴壁,静置,搅拌方式,贴附,搅拌速度,养血,血清浓度,获得最佳,细胞生长,拷贝数,草鱼出血病,病疫苗,规模化生产,微载体培养
AB值：
0.292727
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