典型文献
一株湖北源大口黑鲈蛙病毒的分离鉴定
文献摘要：
采用电子显微镜观察和细胞培养等技术,从湖北黄陂某养殖场患病大口黑鲈(Micropterus salmoides)体内发现并分离到一株蛙病毒.患病大口黑鲈的临床症状主要表现为体表出血、溃疡,肝脏发白.将病鱼内脏组织匀浆超微滤液接种鳜脑细胞系(mandarin fish brain,MFB)细胞能产生典型细胞病变效应(cytopathic effect,CPE),病毒滴度达到108.36±0.15TCID50/mL.细胞培养病毒的超薄切片电镜观察结果显示,细胞质中存在大量直径约为150 nm左右的正六边形病毒粒子,呈晶格排列.细胞培养病毒的人工感染大口黑鲈试验结果显示,7 d内试验鱼死亡率高达100％,其临床症状与自然发病鱼相似.采用大口黑鲈病毒(largemouth bass virus,LMBV)的特异性PCR检测方法对患病鲈组织样品和细胞培养病毒样品进行检测,均能扩增出241 bp的单一目的条带.进一步根据GenBank中LMBV主衣壳蛋白(major capsid protein,MCP)基因序列设计特异性引物,均能从上述样品中扩增出1392 bp的MCP基因开放阅读框(open reading frame,ORF)全长.将MCP氨基酸全序列进行比对,结果显示其与Santee-Cooper蛙病毒、孔雀鱼病毒6型及大口黑鲈溃疡综合征病毒的MCP氨基酸序列同源性高达100％.系统进化结果显示,与感染鱼类的虹彩病毒科蛙病毒属病毒,如鳜鱼蛙病毒、Santee-Cooper蛙病毒、孔雀鱼病毒6型和大口黑鲈溃疡综合征病毒等聚成一支.这些结果证明,该分离株为虹彩病毒科蛙病毒属的成员,暂命名为大口黑鲈蛙病毒(largemouth bass ranavirus,LMBRaV)湖北株LMBRaV-HB001.病毒敏感细胞系筛选试验结果表明,病毒LMBRaV-HB001感染鲤上皮瘤细胞(epithelioma papulosum cyprinid,EPC)、草鱼性腺细胞(grass carp ovary,GCO)、大鲵肌肉细胞(giant salamander muscle,GSM)和鲫脑组织细胞(gibel carp brain,GiCB)均能产生典型 CPE,病毒滴度可达 108.0TCID50/mL以上.本研究首次在湖北省养殖大口黑鲈体内分离与鉴定了 LMBRaV病毒,建立了病毒的细胞培养方法,为进一步研究该病毒的传播、诊断和防控技术提供了重要参考.
文献关键词：
大口黑鲈;蛙病毒;细胞培养;病毒分离鉴定
中图分类号：
作者姓名：
罗晓雯;沈锦玉;阳涛;曾令兵;周勇;范玉顶;刘文枝;李逸群;薛明洋;孟彦;江南
作者机构：
中国水产科学研究院长江水产研究所,湖北武汉430223;浙江省淡水水产研究所,浙江湖州313001;通威股份动物保健研究所,四川成都610041
文献出处：
引用格式：
[1]罗晓雯;沈锦玉;阳涛;曾令兵;周勇;范玉顶;刘文枝;李逸群;薛明洋;孟彦;江南-.一株湖北源大口黑鲈蛙病毒的分离鉴定)[J].中国水产科学,2022(03):494-502
A类：
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B类：
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AB值：
0.356009
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