免疫球蛋白是鱼类适应性免疫中主要的效应因子之一,研究鱼类免疫球蛋白对鱼类疾病的免疫防控尤为重要.本研究利用PCR与RACE技术克隆获得青鲫(Carassius auratus indigentiaus)分泌型免疫球蛋白Z(secretory immunoglobulin Z,sIgZ)重链基因cDNA全长序列(基因序列登录号:MZ274344.1),青鲫sIgZ重链基因cDNA序列全长2083 bp,其开放阅读框长1668 bp,编码一条由556个氨基酸组成的肽链,相对分子质量为61.59 kD,理论等电点为7.03.青鲫sIgZ重链基因结构由1个可变区(VH),4个恒定区(CH1-CH4)以及1个分泌型的尾部(secretory tail,Sec tail)构成.在GenBank中进行同源序列检索,青鲫sIgZ氨基酸序列与其他鱼类IgZ的相似性依次为团头鲂(Megalobrama amblycephala)(63.17％)、草鱼(Ctenopharyngodon idella)(60.82％)、鲤(Cyprinus carpio carpio)(52.98％)、虹鳟(Oncorhynchus mykiss)(37.06％)和金头鲷(Sparus aurata)(35.01％).利用 MEGA 5.1 软件进行多重序列比对分析,采用邻接法构建遗传系统进化树,发现青鲫sIgZ基因与同属鲤科(Cyprinidae)鱼类的IgZ聚为一支,青鲫sIgZ与团头鲂的sIgZ亲源关系最近.通过qPCR检测青鲫不同组织中sIgZ基因的表达,发现青鲫头肾中sIgZ基因的表达量最高,中肾、脾和肝脏次之.利用嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)对青鲫进行浸泡感染,sIgZ在头肾、脾脏、中肾、肝、肠、鳃和皮肤中的表达水平在感染的28 d内先升高后降低,sIgZ的相对表达量在黏膜免疫组织(肠和皮肤)中达到峰值的时间要早于系统免疫组织(头肾和脾脏),肠和皮肤中sIgZ在峰值时的相对表达量显著高于头肾中sIgZ在峰值时的相对表达量,实验结果显示,青鲫sIgZ在肠和皮肤黏膜免疫组织中可能发挥重要的免疫功能.

免疫球蛋白Z;黏膜免疫;青鲫;嗜水气单包菌

夏虎;杨品红;张运生;陈中元;刘良国;罗玉双;肖丕清;方秀;孟诗雅;路典敬

湖南文理学院生命与环境科学学院;水生动物重要疫病分子免疫技术湖南省重点实验室,微生物技术创新团队;常德市农业生物大分子研究中心,湖南常德415000;湖南湘云生物科技有限公司,湖南常德415000;湖南省常德市安乡县农业农村局,湖南常德415600

中国水产科学

[1]夏虎;杨品红;张运生;陈中元;刘良国;罗玉双;肖丕清;方秀;孟诗雅;路典敬-.青鲫sIgZ重链基因的克隆及对嗜水气单胞菌的免疫响应)[J].中国水产科学,2022(10):1449-1460

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