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典型文献
基于重组酶介导等温扩增-侧流层析试纸条的
文献摘要:
为快速和现场检测玉米褪绿斑驳病毒(maize chlorotic mottle virus,MCMV),根据MCMV外壳蛋白(coat protein,CP)基因设计引物和探针,将一步法反转录重组酶介导的等温扩增(one-step reverse transcript recombinase-aid amplification,RT-RAA)技术与侧流层析试纸条(lateral flow assay,LFA)结合建立一种快速检测MCMV的方法,对该方法的探针浓度、反应温度和反应时间进行优化,并对优化后方法的特异性和灵敏度进行检测.结果表明,该检测方法的最佳探针浓度为0.02 μmol/L,最佳反应温度为37℃,最佳反应时间为8 min;该检测方法的特异性强且对MCMV RNA的检测灵敏度为8.6×10-6ng/μL,比常规RT-PCR方法的灵敏度提高10倍,对MCMV CP质粒DNA拷贝数的检测灵敏度为92.5 copies/μL,比常规RT-PCR方法的灵敏度提高10倍;该检测方法用时短,约13 min,其中RT-RAA仅需8 min,LFA仅需5 min,且操作简单,可用于MCMV的实时监测及病害的田间快速诊断.
文献关键词:
玉米褪绿斑驳病毒;等温扩增;侧流层析试纸条;外壳蛋白
作者姓名:
邝瑞瑞;雷荣;孙夕雯;赵振兴;焦志远;张永江;范在丰
作者机构:
中国农业大学植物保护学院,农业农村部植物检疫性有害生物监测防控重点实验室,北京100193;中国检验检疫科学研究院植物检疫研究所,北京100176;沈阳农业大学土地与环境学院,沈阳110866
文献出处:
引用格式:
[1]邝瑞瑞;雷荣;孙夕雯;赵振兴;焦志远;张永江;范在丰-.基于重组酶介导等温扩增-侧流层析试纸条的)[J].植物保护学报,2022(05):1457-1463
A类:
玉米褪绿斑驳病毒
B类:
重组酶介导等温扩增,侧流层析试纸条,现场检测,maize,chlorotic,mottle,virus,MCMV,外壳蛋白,coat,protein,CP,引物,一步法,重组酶介导的等温扩增,one,step,reverse,transcript,recombinase,aid,amplification,RAA,lateral,flow,assay,LFA,快速检测,反应温度,后方法,检测灵敏度,6ng,质粒,拷贝数,copies,田间,快速诊断
AB值:
0.342875
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