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典型文献
新冠病毒RT-LAMP可视化检测方法的建立
文献摘要:
[目的]为了实现对新冠病毒一步法检测.[方法]采用RT-LAMP技术,利用具有反转录酶活性的Bst3.0 DNA聚合酶,以新冠病毒N蛋白基因为模板设计LAMP引物,成功建立了以新冠N蛋白基因为靶基因的RT-LAMP检测方法.同时对反应条件中的温度、镁离子浓度、NTP浓度、甜菜碱浓度以及酶浓度进行优化.通过加入钙黄绿素和氯化锰显色剂对反应结果进行判定,用ASFV p54质粒和JEV NS1质粒与稀释后模板做对照.[结果]温度为66℃,镁离子浓度为6 mmol/L,甜菜碱浓度为1 mol/L,NTP为1.4 mmol/L,酶浓度为160 U/L为最优反应条件.[结论]证明了Bst3.0 DNA聚合酶对新冠N蛋白基因检测是成功的,该方法具有良好的特异性以及灵敏度.
文献关键词:
新型冠状病毒;环介导等温扩增技术;可视化
作者姓名:
刘树荣;陶飞飞;熊园翔;温林;郭韫丽;孔令保
作者机构:
江西农业大学 生物科学与工程学院,江西 南昌 330045;江西农业大学 南昌市动物病毒与基因工程重点实验室,江西 南昌 330045
文献出处:
引用格式:
[1]刘树荣;陶飞飞;熊园翔;温林;郭韫丽;孔令保-.新冠病毒RT-LAMP可视化检测方法的建立)[J].生物灾害科学,2022(04):415-422
A类:
Bst3
B类:
新冠病毒,LAMP,可视化检测方法,一步法,反转录酶,模板设计,引物,靶基因,反应条件,镁离子,离子浓度,NTP,甜菜碱,碱浓度,钙黄绿素,氯化锰,显色剂,ASFV,p54,质粒,JEV,NS1,基因检测,环介导等温扩增技术
AB值:
0.35272
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