典型文献
基于全基因组序列合成的禽副黏病毒Ⅱ型反向遗传操作系统的建立
文献摘要：
为建立禽副黏病毒Ⅱ型(avian paramyxovirus 2,APMV-2)的反向遗传操作平台,对NCBI已经公布的12条APMV-2全基因组序列进行分析比对,选取较为保守的F8株为模板,将该毒株基因组中特有的10处核苷酸突变为其他毒株共有的一致序列,增加一段大部分毒株共有的非编码区序列,获得了 1株新的APMV-2(命名为Y2株)的全基因组序列.通过人工合成和克隆的方法,构建并获得了 Y2株全长cDNA克隆质粒和3个分别表达NP、P和L的辅助质粒.将4个重组质粒共转染至感染痘病毒的BHK-21细胞,成功拯救出APMV-2 Y2株.生物学特性测定结果显示,Y2株的鸡胚最低致死剂量的平均致死时间(MDT)大于168 h,1日龄雏鸡的脑内致病指数(ICPI)为0.09,判定为弱毒株,鸡胚尿囊液的病毒含量为108.83EID50/mL,HA效价为9 log2.病毒增殖曲线测定结果显示,Y2株感染BHK-21细胞后60 h滴度达到峰值.APMV-2 Y2株反向遗传操作系统的建立为该病原的致病机理研究及新型禽用疫苗研发提供了依据.
文献关键词：
禽副黏病毒Ⅱ型;反向遗传技术;新城疫病毒;人工合成
中图分类号：
作者姓名：
王国康;李丽;贾妙妙;冯贺龙;曾驰;罗青平;温国元
作者机构：
湖北省农业科学院畜牧兽医研究所,湖北武汉430064;农业农村部畜禽细菌病防治制剂创制重点实验室,湖北武汉430064;畜禽病原微生物学湖北省重点实验室,湖北武汉430064;武汉轻工大学生物与制药工程学院,湖北武汉430023
文献出处：
引用格式：
[1]王国康;李丽;贾妙妙;冯贺龙;曾驰;罗青平;温国元-.基于全基因组序列合成的禽副黏病毒Ⅱ型反向遗传操作系统的建立)[J].中国兽医学报,2022(03):464-471
A类：
paramyxovirus,83EID50
B类：
全基因组序列,副黏病毒,遗传操作,操作系统,avian,APMV,操作平台,NCBI,F8,毒株,核苷酸突变,非编码区,Y2,人工合成,全长,cDNA,NP,重组质粒,共转染,痘病毒,BHK,拯救,救出,生物学特性,测定结果,鸡胚,致死时间,MDT,日龄,雏鸡,病指,ICPI,尿囊,囊液,病毒含量,HA,效价,log2,病毒增殖,滴度,立为,致病机理,禽用疫苗,疫苗研发,反向遗传技术,新城疫病毒
AB值：
0.382888
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