目的:构建小鼠miR-204过表达重组慢病毒载体，并在二氧化硅（SiO 2）诱导的小鼠肺上皮细胞（MLE-12细胞）中验证miR-204与DVL3的靶向调控作用。 方法:于2019年10月，从小鼠基因组中应用聚合酶链式反应（PCR）法扩增出pre-miR-204基因，测序后将扩增产物克隆到pLenti-CMV-EGFP慢病毒载体，通过PCR筛选及测序对阳性克隆进行鉴定。将miR-204过表达慢病毒载体转染至293T细胞，进行慢病毒的包装和滴度测定，研究分为SiO 2对照组、病毒对照组及miR-204病毒组，实时荧光PCR检测miR-204和DVL3基因的表达。 结果:构建miR-204慢病毒表达载体Lv-miR-204-5p经PCR和测序鉴定正确，并获得滴度为9.57×10 8 IU/ml的病毒稀释液；实时荧光PCR检测结果显示，miR-204病毒组MLE-12细胞中miR-204基因的表达高于SiO 2对照组和病毒对照组，DVL3基因的表达低于SiO 2对照组和病毒对照组，差异均有统计学意义（ P<0.05）。 结论:miR-204过表达慢病毒载体可能在SiO 2诱导的MLE-12细胞中抑制DVL3基因的表达。

二氧化硅;miR-204;慢病毒;载体构建;小鼠

王欣;曾强;李培;高雅;娄贺仁

天津市疾病预防控制中心职业健康研究所，天津　300011

中华劳动卫生职业病杂志

[1]王欣;曾强;李培;高雅;娄贺仁-.二氧化硅诱导小鼠肺上皮细胞中miR-204靶向调控DVL3基因的作用)[J].中华劳动卫生职业病杂志,2022(05):328-332

DVL3,SiO

二氧化硅,小鼠肺上皮细胞,miR,靶向调控,过表达,重组慢病毒,慢病毒载体,MLE,聚合酶链式反应,pre,扩增产物,pLenti,CMV,EGFP,转染,293T,滴度,病毒组,慢病毒表达载体,Lv,5p,10 ,IU,ml,稀释液,载体构建

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