目的 研究Rad51基因沉默后对醋酸铅染毒致人淋巴母细胞(TK6细胞)DNA双链断裂损伤的修复作用的影响.方法 构建Rad51沉默慢病毒载体及阴性对照,感染对数期TK6细胞,荧光定量PCR和Western blot验证感染效果.运用480 μmol/L的醋酸铅染毒TK6细胞24 h(Control组、shRNA-NC组和shRNA-Rad51组),采用免疫荧光法检测TK6细胞的磷酸化组蛋白H2AX(γ-H2AX)的表达,Western Blot检测TK6细胞的Rad51、BRCA1、53BP1蛋白的表达.结果 shRNA-Rad51组的Rad51 mRNA表达水平和Rad51蛋白表达水平均低于Control组及shRNA-NC组(P＜ 0.01);shRNA-Rad51组的γ-H2AX阳性率为(27.48±1.66)％,与Control组的(14.77±1.21)％及shRNA-NC组的(14.04±1.31)％比较,差异均有统计学意义(P＜0.01);shRNA-Rad51组的BRCA1蛋白表达水平为(0.25±0.03),与Control组的(0.55±0.04)及shRNA-NC组的(0.51±0.04)比较,差异均有统计学意义(P＜ 0.01);shRNA-Rad51组的53BP1蛋白表达水平为(3.24±0.27),与Control组的(2.01±0.19)及shRNA-NC组的(2.11±0.17)比较,差异均有统计学意义(P＜0.01).结论 Rad51基因沉默后,TK6细胞HR修复通路受抑制和NHEJ修复通路激活,TK6细胞对铅遗传毒性的敏感性增强.

醋酸铅;人淋巴母细胞;TK6细胞;DNA双链断裂;基因沉默;Rad51基因;损伤修复

刘祥铨;吴京颖;林秀洁;陈美芳

福州市疾病预防控制中心,福建福州350004;厦门医学院,福建厦门361023;福建省福州神经精神病防治院,福建福州350008;福州市中医院,福建福州 350001

职业卫生与应急救援

[1]刘祥铨;吴京颖;林秀洁;陈美芳-.Rad51基因沉默对铅诱导TK6细胞DNA双链断裂损伤修复的影响)[J].职业卫生与应急救援,2022(01):5-9

TK6,双链断裂损伤修复

Rad51,基因沉默,醋酸铅,铅染毒,人淋巴母细胞,修复作用,慢病毒载体,blot,Control,shRNA,NC,免疫荧光法,磷酸化,组蛋白,H2AX,Blot,BRCA1,53BP1,蛋白表达水平,复通,NHEJ,遗传毒性

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