目的 探讨微小RNA 203-3p(miR-203)靶向调控枯灵素2(CUL2)对人乳头瘤病毒16型(HPV16)阳性宫颈癌细胞生物学特性的影响.方法 收集2018年9月-2019年9月于山西医科大学第二医院妇产科行宫颈癌筛查,HPV检测为单一HPV16阳性,病理检查为宫颈鳞癌(SCC)的样本及相应癌旁组织(对照组)各10份.采用实时定量反转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测SCC与相应癌旁组织,以及人SCC细胞(SiHa)与人永生化表皮细胞(HaCaT)中miR-203的表达.采用GO和KEGG富集法分析miR-203参与的功能和通路,TargetScan网站及双荧光素酶报告基因实验验证miR-203与CUL2的靶向调控作用.将miR-203模拟物或抑制剂转染至SiHa细胞,建立过表达或低表达miR-203的细胞模型,采用qRT-PCR和Western blotting检测CUL2 mRNA及蛋白的表达;采用CCK-8法、划痕实验、AnnexinⅤ-APC/PI双染色法评估SiHa细胞的增殖、迁移和凋亡能力.结果 qRT-PCR检测分析结果显示,与相应癌旁组织和HaCaT细胞相比,miR-203在SCC组织和SiHa细胞中的表达水平均明显降低(P<0.01).GO和KEGG富集结果显示,miR-203广泛参与泛素化过程并与恶性肿瘤参与的信号通路有关.TargetScan与双荧光素酶报告基因实验表明,miR-203与CUL2存在靶向调控关系(P<0.01).qRT-PCR及Western blotting结果表明,过表达miR-203时,CUL2 mRNA及蛋白表达水平均明显降低(P<0.05或P<0.01),而低表达miR-203则可上调CUL2 mRNA及蛋白的表达(P<0.01).CCK-8、划痕实验和AnnexinⅤ-APC/PI双染结果显示,过表达miR-203可降低SiHa细胞的增殖率和迁移率(P<0.01),升高细胞凋亡率(P<0.05);相反,低表达miR-203可升高SiHa细胞的增殖率和迁移率(P<0.01),降低细胞凋亡率(P<0.01).结论 miR-203可能通过靶向CUL2抑制HPV16阳性宫颈癌细胞SiHa的生物学特性,有望成为宫颈癌诊断和治疗的一个新的候选基因.

宫颈癌;微小RNA 203-3p;枯灵素2;人乳头瘤病毒16型

李亚芹;刘亚涛;张宏蕾;赵卫红

山西医科大学第二临床医学院妇产科,山西太原 030001;山西医科大学第二医院妇产科,山西太原 030001;山西医科大学基础医学院病理学与病理生理学系,山西太原 030001

解放军医学杂志

[1]李亚芹;刘亚涛;张宏蕾;赵卫红-.miR-203靶向调控CUL2对HPV16阳性宫颈癌细胞生物学特性的影响)[J].解放军医学杂志,2022(10):968-975

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