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野生型及突变型人Toll样受体2 3'非编码区基因重组质粒的构建及鉴定
文献摘要：
目的 构建野生型及突变型人Toll样受体2(Toll-like receptor 2,TLR2)3'非编码区(3'UTR)基因重组质粒,并进行鉴定.方法 提取293T细胞基因组DNA,以其为模板进行PCR扩增,获得TLR2的3'UTR基因片段,连接至载体pmiR-RB-REPORT?,转化感受态E.coli DH5α,于LB(Amp+)固体培养基中培养过夜,菌落PCR筛选阳性克隆,并测序.根据TLR2 3'UTR与miR-122的预测结合靶点,设计突变型TLR2 3'UTR扩增引物,以构建的野生型TLR2 3'UTR重组质粒为模板,PCR扩增突变序列,相同方法进行载体连接及转化,挑取菌落,测序.结果 野生型TLR2 3'UTR重组菌经菌落PCR鉴定,可见1 000 bp的目的基因片段,大小与预期相符;测序结果表明,插入序列与TLR2 3'UTR序列完全一致.突变型TLR2 3'UTR重组质粒测序鉴定结果表明,靶序列CACTCC已更改为GTGAGG.结论 成功构建了野生型及突变型人TLR2 3'UTR重组质粒,本实验为TLR2功能的深入研究提供了实验依据.
文献关键词：
Toll样受体2;3’非编码区;基因重组
中图分类号：
作者姓名：
包丽丽;孙传凯;李晓玫;任向宇;殷兆丽;孙晓琳;福泉;纳仁高娃
作者机构：
内蒙古医科大学基础医学院,内蒙古呼和浩特010059;内蒙古医科大学附属医院,内蒙古呼和浩特010050
文献出处：
引用格式：
[1]包丽丽;孙传凯;李晓玫;任向宇;殷兆丽;孙晓琳;福泉;纳仁高娃-.野生型及突变型人Toll样受体2 3'非编码区基因重组质粒的构建及鉴定)[J].中国生物制品学杂志,2022(05):557-561
A类：
pmiR,Amp+,CACTCC,GTGAGG
B类：
野生型,突变型,Toll,样受体,非编码区,基因重组,重组质粒,like,receptor,TLR2,UTR,293T,RB,REPORT,化感,感受态,coli,DH5,LB,固体培养基,过夜,菌落,扩增引物,bp,目的基因,插入序列,完全一致,靶序列,更改
AB值：
0.252743
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