目的 探讨微小RNA(miR)-128-3p对卵巢癌细胞上皮-间充质转化(EMT)的影响及其对锌指E盒同源结合蛋白1(ZEB1)的调控机制.方法 通过Real-time PCR技术检测上皮性卵巢癌组织(EOC)及癌旁正常组织(各30例)中miR-128-3p的表达量并观察其是否存在差异;选取2种人卵巢癌细胞系SKOV3和A2780,分别转染miR-128-3p模拟物(miR-128-3p mimic)组和阴性对照模拟物(NC mimic)组,利用Real-time PCR技术检测4组miR-128-3p的表达量并验证干扰效果,用Transwell实验观察4组细胞的迁移及侵袭能力.通过双荧光素酶实验验证miR-128-3p与ZEB1的调控关系,用Western blotting检测过表达miR-128-3p后ZEB1蛋白的表达水平;在SKOV3和A2780细胞系中转染pcDNA-ZEB1使其过表达ZEB1,分为NC mimic组,miR-128-3p mimic组,miR-128-3p mimic+pcDNA-ZEB1组,用Western blotting检测6组细胞中EMT相关蛋白E-钙黏蛋白(E-cadherin)及波形蛋白(vimentin)的表达水平.结果 Real-time PCR结果显示,与癌旁组织相比,miR-128-3p在EOC组织中表达下降(P＜0.01);miR-128-3p mimic组miR-128-3p相对表达量高于NC mimic组,而迁移细胞数量、侵袭细胞数量低于NC mimic组(P＜0.01).双荧光素酶实验结果显示,miR-128-3p对ZEB1存在负向调控作用.SKOV3、A2780细胞中miR-128-3p mimic组的ZEB1蛋白相对表达量均低于NC mimic组,而E-cadhein的蛋白相对表达量均高于NC mimic组(P＜0.01).MiR-128-3p mimic+pcDNA-ZEB1 组 E-cadhein 的蛋白相对表达量低于 miR-128-3p mimic 组(P＜0.01).SKOV3、A2780 细胞中 miR-128-3p mimic 组 vimentin 的蛋白相对表达量低于 NC mimic 组,miR-128-3p mimic+pcDNA-ZEB1组vimentin的蛋白相对表达量高于miR-128-3p mimic组(P＜0.01).结论 MiR-128-3p在上皮性卵巢癌组织中表达下降,其原因可能是通过调控ZEB1影响EMT相关蛋白表达而参与卵巢癌细胞EMT过程.

微小RNA-128-3P;锌指E盒同源结合蛋白1;卵巢癌;上皮-间充质转化;实时定量聚合酶链反应;人

徐玉红;张慧雅;王运根;陈君霞

浙江省绍兴市人民医院妇科,浙江绍兴 312000

解剖学报

[1]徐玉红;张慧雅;王运根;陈君霞-.微小RNA-128-3p通过调控锌指盒同源结合蛋白1抑制卵巢癌细胞上皮-间充质转化)[J].解剖学报,2022(06):762-768

cadhein

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