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典型文献
高糖对体外培养视网膜Müller细胞自噬及凋亡的影响
文献摘要:
目的::探究高糖诱导体外培养的视网膜Müller细胞自噬及凋亡的变化。方法::实验研究。将体外培养的SD大鼠视网膜Müller细胞根据不同糖浓度分为5.5 mmol/L葡萄糖组(正常组)及20、30、40、50 mmol/L高糖组,并对40 mmol/L高糖处理Müller细胞组采用不同时间3、6、12、24、36 h进行培养。使用蛋白免疫印迹法及细胞免疫荧光检测自噬指标LC3Ⅰ/LC3Ⅱ、自噬信号通路P62、Beclin-1蛋白表达及细胞定位;使用透射电镜及GFP-LC3慢病毒转染观察自噬小体的形成情况;使用TUNEL实验检测细胞凋亡状态。不同组别间数据比较采用单因素方差分析。结果::正常组及20、30、40、50 mmol/L高糖组中Müller细胞质的Beclin-1、P62及LC3Ⅰ/LC3Ⅱ蛋白相对表达量总体比较,差异均有统计学意义( F=131.21, P=0.029; F=197.25, P=0.012; F=100.02, P=0.045),其中与正常组比较各浓度高糖组Müller细胞质内Beclin-1、LC3Ⅰ/LC3Ⅱ蛋白均明显降低( P<0.05),P62蛋白相对表达量明显增加( P<0.001)。正常组以及6、12、24、36 h高糖组中Müller细胞质的Beclin-1、P62及LC3Ⅰ/LC3Ⅱ蛋白相对表达量总体比较,差异均有统计学意义( F=98.46, P=0.015; F=109.48, P=0.004; F=99.27, P=0.032),其中6 h高糖组LC3Ⅰ/LC3Ⅱ、Beclin-1蛋白明显增加( P=0.002、0.015),12、24、36 h高糖组与正常组相比较LC3Ⅰ/LC3Ⅱ、Beclin-1蛋白均明显下降( P<0.05),P62蛋白明显增加( P<0.001)。正常组及6、24 h高糖组视网膜Müller细胞中GFP-LC3转染阳性颗粒、自噬小体相对数量组间总体差异有统计学意义( F=240.49, P=0.014; F=198.98, P=0.001),其中与正常组比较,6 h高糖组GFP-LC3转染阳性颗粒、自噬小体相对数量增加( P=0.002、0.029),24 h高糖组明显降低( P=0.019、0.036)。正常组及6、24 h高糖组及3MA组视网膜Müller细胞凋亡指数分别为3.14±1.01、15.34±3.87、25.82±4.96、24.79±4.01,总体比较差异有统计学意义( F=234.12, P=0.003),与正常组比较,6、24 h高糖组TUNEL阳性细胞增多( P=0.022、0.039),24 h高糖组与6 h高糖组比较TUNEL阳性细胞进一步增加( P=0.017)。 结论::高糖诱导体外培养的视网膜Müller细胞早期自噬增加,细胞凋亡抑制,随着时间不断延长,高糖抑制自噬形成,增加细胞凋亡。高糖抑制自噬可能是促进Müller细胞凋亡的重要原因。
文献关键词:
糖尿病视网膜病变;高糖;自噬;凋亡;Müller细胞
作者姓名:
王立;颜世传;牛兰俊;朱曼辉;孙晓东;徐迅;宋鄂
作者机构:
苏州大学附属理想眼科医院,苏州 215021;上海市第一人民医院,上海 200080
引用格式:
[1]王立;颜世传;牛兰俊;朱曼辉;孙晓东;徐迅;宋鄂-.高糖对体外培养视网膜Müller细胞自噬及凋亡的影响)[J].中华眼视光学与视觉科学杂志,2022(01):17-26
A类:
B类:
体外培养,ller,细胞自噬,高糖诱导,糖浓度,蛋白免疫印迹法,细胞免疫,免疫荧光检测,LC3,P62,Beclin,细胞定位,透射电镜,GFP,慢病毒转染,自噬小体,TUNEL,实验检测,组别,数据比较,单因素方差分析,白相,相对表达量,细胞质内,相对数,3MA,阳性细胞,加细,糖尿病视网膜病变
AB值:
0.15033
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