典型文献
应用CRISPR/Cas9技术敲除Mda5基因对新城疫及传染性法氏囊病毒复制的影响
文献摘要:
采用CRISPR/Cas9技术敲除DF-1的黑色素瘤分化相关基因5(melanoma-differentiation-associated gene 5,Mda5),探索Mda5基因对新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)和传染性法氏囊病毒(infectious bursal disease virus,IBDV)复制的影响.通过CRISPR/Cas9技术构建Mda5敲除的DF-1细胞系;实时荧光定量PCR和免疫荧光法检测病毒感染Mda5敲除细胞后病毒RNA水平、细胞病变情况及抗病毒相关基因mRNA水平等.获得Mda5基因敲除的DF-1细胞;与对照组细胞相比,细胞形态、贴壁能力和增殖能力均无显著性差异;与对照组细胞相比,Mda5基因敲除的DF-1细胞感染IBDV后,IFN-β和PKR表达显著性下调,CH25H的表达和病毒复制水平均无显著性差异;感染NDV后,IFN-β表达和病毒复制水平显著性下调,CH25H表达量显著性上调,PKR表达无显著性差异.CRISPR/Cas9技术建立Mda5敲除的DF-1中,IFN-β虽然显著应答IBDV和NDV感染,但不能显著抑制病毒的复制,说明Mda5并非抗病毒复制的关键模式识别受体.
文献关键词:
Mda5;新城疫病毒;传染性法氏囊病毒;CRISPR/Cas9;基因敲除
中图分类号:
作者姓名:
钟菁;孙玲玲;张姝;蒙园;支怡飞;涂黎晴;徐天鹏;濮黎萍;陆阳清
作者机构:
广西大学动物科学技术学院,南宁 530004
文献出处:
引用格式:
[1]钟菁;孙玲玲;张姝;蒙园;支怡飞;涂黎晴;徐天鹏;濮黎萍;陆阳清-.应用CRISPR/Cas9技术敲除Mda5基因对新城疫及传染性法氏囊病毒复制的影响)[J].生物技术通报,2022(11):90-96
A类:
Mda5,CH25H
B类:
CRISPR,Cas9,传染性法氏囊病毒,病毒复制,DF,黑色素瘤,melanoma,differentiation,associated,gene,新城疫病毒,Newcastle,disease,virus,NDV,infectious,bursal,IBDV,技术构建,细胞系,免疫荧光法,细胞病变,抗病毒,基因敲除,细胞形态,贴壁,细胞感染,IFN,PKR,复制水平,模式识别受体
AB值:
0.216873
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