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典型文献
棕榈酸诱导小鼠胰岛 β 细胞株MIN6细胞发生铁死亡的研究
文献摘要:
目的:探讨棕榈酸(PA)是否可诱导小鼠胰岛β细胞株MIN6细胞发生铁死亡。方法:将小鼠胰岛β细胞株MIN6细胞分为正常对照组、PA组(1.0 mmol/L)、PA+凋亡抑制剂(Z-VAD-FMK)组(5 μmol/L)、PA+铁死亡抑制剂(Fer-1)组(5 μmol/L)、PA+坏死抑制剂(Nec-1)组(5 μmol/L),每组设置3个平行组。采用CCK8法检测细胞存活率,电镜观察细胞超微结构改变,FerroOrange试剂盒检测细胞内Fe 2+水平,丙二醛(MDA)试剂盒检测MDA水平,流式法检测活性氧(ROS)水平,实时荧光定量PCR法检测凋亡基因半胱氨酸蛋白酶3( caspase3)、坏死基因受体结合丝氨酸苏氨酸激酶3( RIPK3)、铁死亡相关基因长链脂酰辅酶A合成酶4( ACSL4)、花生四烯酸-15-脂加氧酶( ALOX15)、前列腺素内过氧化物合酶2( Ptgs2)、铁蛋白重链( FTH)、铁蛋白轻链( FTL)和谷胱甘肽过氧化物酶4( GPX4)的mRNA表达水平,Western blotting法检测活化型caspase3(cleaved caspase3)、RIPK3、ACSL4、ALOX15和Ptgs2的蛋白表达水平。两组间比较采用 t检验。 结果:与PA组相比,PA+Z-VAD-FMK组、PA+Fer-1组和PA+Nec-1组MIN6的存活率均更高( P<0.01)。PA组MIN6细胞电镜下可见凋亡、坏死、及铁死亡相关的形态学特征。与对照组相比,PA组MIN6细胞内Fe 2+相对荧光强度、MDA水平、总ROS均更高; caspase3、 RIPK3、 ACSL4、 Ptgs2、 ALOX15的mRNA相对表达量均更高, FTH和 GPX4的mRNA相对表达量均更低;cleaved caspase3、RIPK3、ACSL4、ALOX15和Ptgs2的蛋白相对表达量均更高(均 P<0.01)。与PA组相比,PA+Fer-1组Fe 2+相对荧光强度、MDA水平、总ROS均更低; ACSL4、 Ptgs2、 ALOX15的mRNA相对表达量均更低, FTH和 GPX4的mRNA相对表达量均更高;ACSL4、ALOX15和Ptgs2的蛋白相对表达量均更低(均 P<0.01)。 结论:PA可诱导小鼠胰岛β细胞株MIN6细胞发生铁死亡。
文献关键词:
棕榈酸;铁死亡;MIN6细胞
作者姓名:
秦璐;黄逸婷;李雨潇;秦瑶;石毓雯;许馨予;陈恒;张梅
作者机构:
南京医科大学第一附属医院内分泌科,南京 210029
文献出处:
引用格式:
[1]秦璐;黄逸婷;李雨潇;秦瑶;石毓雯;许馨予;陈恒;张梅-.棕榈酸诱导小鼠胰岛 β 细胞株MIN6细胞发生铁死亡的研究)[J].中华糖尿病杂志,2022(05):490-497
A类:
PA+Z,PA+Fer,PA+Nec
B类:
棕榈酸诱导,细胞株,MIN6,生铁,正常对照,VAD,FMK,CCK8,细胞存活率,电镜观察,细胞超微结构,FerroOrange,试剂盒,Fe ,2+,ROS,凋亡基因,半胱氨酸蛋白酶,caspase3,丝氨酸,苏氨酸,RIPK3,铁死亡相关基因,长链,辅酶,合成酶,ACSL4,花生四烯酸,加氧酶,ALOX15,前列腺素,Ptgs2,铁蛋白重链,FTH,轻链,FTL,谷胱甘肽过氧化物酶,GPX4,blotting,cleaved,蛋白表达水平,细胞电镜,形态学特征,相对荧光强度,相对表达量,白相
AB值:
0.219977
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