目的 探讨决明子总蒽醌(CSTA)对过氧化氢(H2O2)诱导人晶状体上皮细胞(LEC)氧化损伤的影响及其相关作用机制.方法 体外培养人LEC细胞系HLE-B3细胞,利用不同浓度梯度CSTA作用于HLE-B3细胞以筛选其最适处理浓度.实验分为对照组(CG组)、H2O2组(H2O2组)、CSTA组和沉默信息调节因子1(Sirt1)抑制剂组(EX527组).四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)检测HLE-B3细胞活力;流式细胞仪检测HLE-B3细胞凋亡情况;酶联免疫(ELISA)检测HLE-B3细胞内丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和超氧化物歧化酶(SOD)含量;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测HLE-B3细胞内Sirt1、PPARγmRNA表达;Western Blot检测HLE-B3细胞内Sirt1、过氧化物酶增殖物活化受体γ(PPARγ)、p-PPARγ蛋白水平.结果 通过设置浓度梯度选择20 mg/L作为CSTA的处理浓度.(1)细胞活力:H2O2组与CG组比较降低(t=23.048,P=0.000),CSTA组与H2O2组比较升高(t=5.669,P=0.000),EX527组与CSTA组比较降低(t=4.151,P=0.002),差异均有统计学意义.(2)细胞凋亡率:H2O2组与CG组比较升高(t=18.480,P=0.000),CSTA组与H2O2组比较降低(t=9.670,P=0.000),EX527组与CSTA组比较升高(t=7.982,P=0.000),差异均有统计学意义.(3)氧化损伤指标:①MDA含量,H2O2组与CG组比较升高(t=13.040,P=0.000),CSTA组与H2O2组比较降低(t=9.602,P=0.000),EX527组与CSTA组比较升高(t=7.575,P=0.000),差异均有统计学意义.②GSH-Px含量,H2O2组与CG组比较降低(t=15.220,P=0.000),CSTA组与H2O2组比较升高(t=11.810,P=0.000),EX527组与CSTA组比较降低(t=9.090,P=0.000),差异均有统计学意义.③SOD含量,H2O2组与CG组比较降低(t=14.930,P=0.000),CSTA组与H2O2组比较升高(t=11.150,P=0.000),EX527组与CSTA组比较降低(t=8.783,P=0.000),差异均有统计学意义.(4)Sirt1 和 PPARγ mRNA:①Sirt1 mRNA,H2O2组与CG组比较降低(t=33.803,P=0.000),CSTA组与H2O2组比较升高(t=13.561,P=0.000),EX527组与CSTA组比较降低(t=10.312,P=0.000),差异均有统计学意义.②PPARγmRNA,四组间比较差异无统计学意义(P＞0.05).(5)Sirt1及p-PPARγ/PPARγ蛋白:①Sirt1蛋白,H2O2组与 CG 组比较降低(t=11.000,P=0.000),CSTA 组与 H2O2组比较升高(t=7.667,P=0.000),EX527组与CSTA组比较降低(t=6.333,P=0.000),差异均有统计学意义.②p-PPARγ/PPARγ蛋白,H2O2组与CG组比较升高(t=16.410,P=).000),CSTA组与H2O2组比较降低(t=13.060,P=0.000),EX527组与CSTA组比较升高(t=10.630,P=0.000),差异均有统计学意义.结论 CSTA可能通过调节Sirt1/PPARγ通路,减轻H2O2诱导HLE-B3细胞氧化损伤.

决明子总蒽醌;沉默信息调节因子1/过氧化物酶增殖物活化受体γ通路;过氧化氢;人晶状体上皮细胞;氧化损伤

何宇;杨德;严宏

重庆市涪陵中心医院眼科,重庆408000;重庆医科大学附属第一医院眼科,重庆400016

中国中医眼科杂志

[1]何宇;杨德;严宏-.决明子总蒽醌调控Sirt1/PPARγ通路对H2O2诱导人晶状体上皮细胞氧化损伤的影响)[J].中国中医眼科杂志,2022(02):94-99,106

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