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高糖环境下Ndufa4线粒体复合体相关蛋白2(Ndufa4l2)对小鼠视网膜感光细胞661W的影响
文献摘要：
目的 探讨高糖环境下Ndufa4线粒体复合体相关蛋白2(Ndufa4l2)对视网膜感光细胞661W功能的影响及其相关机制.方法 体内实验:选取C57BL/6J小鼠12只,采用随机数字表法分为糖尿病组和正常组,每组各6只,糖尿病组小鼠采用腹腔注射链脲佐菌素造模,正常组小鼠腹腔注射等体积柠檬酸缓冲液.采用免疫组织化学法检测Ndufa4l2蛋白在正常组和糖尿病组小鼠视网膜中的表达情况.体外实验:将661 W细胞随机分组为对照组(细胞采用正常培养基培养24 h)、高糖组(细胞采用含葡萄糖浓度为50 mmol·L-1高糖培养基培养24 h)、si-NC组(细胞转染si-NC无序序列后,采用正常培养基培养24 h)、si-NC+HG组(细胞转染si-NC无序序列后,采用含50 mmol·L-1葡萄糖的培养基培养24 h)和si-Ndufa4l2+HG组(细胞转染si-Ndufa4l2特异敲低序列后,采用含50 mmol·L-1葡萄糖的培养基培养24 h);采用qRT-PCR和Western blot检测对照组和高糖组细胞中Ndufa4l2的表达情况.CCK-8法检测si-Ndufa4l2对661W细胞活性的影响,采用活性氧(ROS)试剂盒检测si-Ndufa4l2对661W细胞中ROS水平的影响,采用乳酸检测试剂盒检测si-Ndufa4l2对661W细胞中乳酸水平的影响.结果 体内实验结果表明,与正常组小鼠相比,糖尿病组小鼠视网膜中Ndufa4l2蛋白表达降低.体外实验结果显示,对照组和高糖组661W细胞中Ndufa4l2 mRNA相对表达量分别为1.001±0.069和0.356±0.071,Ndufa4l2蛋白相对表达量分别为1.000±0.078和0.795±0.070,与对照组相比,高糖组661W细胞中的Ndufa4l2 mRNA和蛋白达表水平均下降(均为P<0.05).CCK-8法检测发现,si-Ndufa4l2+HG组661W的细胞活力低于si-NC+HG组(P<0.001).ROS检测结果表明,si-Ndufa4l2+HG组661W细胞的荧光亮度高于si-NC+HG组.细胞上清乳酸检测结果显示,si-NC组、si-NC+HG组和si-Ndufa4l2+HG组细胞上清中乳酸含量分别为(10.470±0.140)mmol·L-1、(7.480±0.270)mmol·L-1和(6.080±0.240)mmol·L-1,si-Ndufa4l2+HG组与si-NC+HG组相比,细胞上清中乳酸含量进一步降低(P<0.001).结论 线粒体Ndufa4l2蛋白在高糖条件下低表达,Ndufa4l2水平下降会通过氧化磷酸化途径损伤细胞的代谢功能从而进一步抑制661 W的细胞活力.
文献关键词：
糖尿病视网膜病变;线粒体;Ndufa4线粒体复合体相关蛋白2;活性氧
中图分类号：
作者姓名：
温艳君;张雪蕊;韦严;赵培泉
作者机构：
200092 上海市杨浦区,上海交通大学医学院附属新华医院眼科;200031 上海市徐汇区,复旦大学附属眼耳鼻喉科医院眼科
文献出处：
引用格式：
[1]温艳君;张雪蕊;韦严;赵培泉-.高糖环境下Ndufa4线粒体复合体相关蛋白2(Ndufa4l2)对小鼠视网膜感光细胞661W的影响)[J].眼科新进展,2022(04):262-266
A类：
Ndufa4,Ndufa4l2,Ndufa4l2+HG
B类：
高糖环境,复合体,感光,661W,对视,相关机制,体内实验,C57BL,6J,腹腔注射,链脲佐菌素,小鼠腹腔,柠檬酸,缓冲液,免疫组织化学法,体外实验,葡萄糖浓度,si,细胞转染,NC+HG,敲低,qRT,blot,CCK,细胞活性,用活,ROS,检测试剂盒,相对表达量,白相,细胞活力,光亮度,亮度高,上清,酸含量,高糖条件,低表达,氧化磷酸化,代谢功能,糖尿病视网膜病变
AB值：
0.156254
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