典型文献
在无天然游离质粒产甘油假丝酵母中非整合表达合成咖啡酸
文献摘要：
[背景]咖啡酸(3,4-二羟基肉桂酸)是一种有多种生物活性和药用价值的天然酚类化合物,产甘油假丝酵母(Candida glycerinogenes)具有咖啡酸前体代谢途径,高耐酸且生长与发酵速率快,是潜在高产咖啡酸的底盘细胞,但无游离载体将影响咖啡酸合成的深入研究.[目的]探索在无天然游离质粒的C.glycerinogenes中构建操作更简便、表达能力更强的游离载体合成咖啡酸的可行性.[方法]筛选自主复制序列(autonomously replicating sequence,ARS),构建适用于 C.glycerinogenes合成咖啡酸的游离载体,并通过改造其ARS位置、标记基因URA5启动子长度、基因表达元件和利用Kozak序列优化表达并合成咖啡酸.[结果]构建的5个分别含不同ARS的载体中,pTGAPU-CA-AOX1t-KLARS在C.glycerinogenes中能自我复制并表达合成咖啡酸的基因,而且当ARS位于目的基因表达元件上游、URA5启动子截短250 bp,或分别采用Kozak序列与终止子URA5t后,咖啡酸产量较改造前均有明显提升,最高产量为初始产量的3.73倍,达29.1 mg/L,高于前期整合表达产量.[结论]在C.glycerinogenes中非整合表达合成咖啡酸且优于整合表达,为今后利用游离载体改造咖啡酸合成代谢途径提供了新工具,同时为其他无游离质粒菌株构建非整合表达体系提供参考.
文献关键词：
产甘油假丝酵母;咖啡酸;游离载体;载体改造;自主复制序列
中图分类号：
作者姓名：
董德金;王心仪;宗红;陆信曜;诸葛斌
作者机构：
江南大学工业生物技术教育部重点实验室,江苏无锡214122;江南大学生物工程学院工业微生物及多元醇研究设计中心,江苏无锡214122
文献出处：
引用格式：
[1]董德金;王心仪;宗红;陆信曜;诸葛斌-.在无天然游离质粒产甘油假丝酵母中非整合表达合成咖啡酸)[J].微生物学通报,2022(10):4104-4117
A类：
产甘油假丝酵母,glycerinogenes,游离载体,自主复制序列,URA5,pTGAPU,AOX1t,KLARS,URA5t,前期整合,载体改造
B类：
质粒,整合表达,咖啡酸,肉桂酸,药用价值,酚类化合物,Candida,代谢途径,耐酸,底盘细胞,表达能力,选自,autonomously,replicating,sequence,标记基因,启动子,子长,Kozak,序列优化,并合,CA,目的基因,bp,终止子,高产量,初始产量,达产,合成代谢,表达体系
AB值：
0.207257
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