典型文献
梨果黑斑病菌互隔交链孢(Alternaria alternata)hnr基因的克隆及其对侵染结构分化的调控
文献摘要：
[背景]羟基萘还原酶(hydroxynaphthalene reductase,HNR)是1,8-间苯二酚(1,8-dihydroxynaphthalene,DHN)黑色素合成途径中起关键作用的酶,研究表明HNR不仅参与真菌黑色素合成,而且对其生长发育及致病性也具有一定的调控作用,但HNR对真菌病原物侵染结构分化的调控研究鲜见报道.[目的]在对梨果黑斑病菌互隔交链孢(Alternaria alternata)HNR的基因进行克隆与生物信息学分析的基础上,通过药理学方法初步探讨HNR对A.alternata生长及侵染结构分化的调控作用,为进一步揭示HNR在A.alternata侵染结构分化形成过程中的分子机制提供理论依据.[方法]对梨果黑斑病菌A.alternata的2个hnr基因进行了克隆;通过gene structure display server、open reading frame(ORF)Finder 及 conserved domain search 等数据库及相关软件,对hnr基因及蛋白进行生物信息学分析,并利用HNR特异性抑制剂三环唑处理分析其对A.alternata生长发育、黑色素合成和侵染结构形成的影响,同时采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)技术分析了 hnr基因在A.alternata不同侵染结构分化时期的表达特性.[结果]从梨果黑斑病菌A.alternata克隆得到2个羟基萘还原酶基因 hnr的编码区全长,分别命名为Aa4hnr和Aa3hnr,其中Aa4hnr基因全长为1 266 bp,编码了 268个氨基酸,无内含子,有9个ORF;Aa3hnr基因全长为1 356 bp,编码了 267个氨基酸,含有2个大小分别为51bp和49 bp的内含子,有17个ORF;进化分析表明,Aa4hnr 和 Aa3hnr 与 Ophiobolus disseminans 和 Alternaria arborescens 分别具有较高的一致性,同时Aa4hnr和Aa3hnr编码的蛋白均含有NAD(P)结合域,属于短链脱氢酶/还原酶(short-chain dehydrogenase/reductase,SDR)家族.药理学结果表明,三环唑处理显著降低了 A.alternata DHN黑色素的生物合成,抑制了疏水性诱导的A.alternata侵染结构的形成;进一步分析Aa4hnr和Aa3hnr在疏水表面诱导的A.alternata孢子萌发阶段(2h)、附着胞形成阶段(6 h)、侵染菌丝形成阶段(8 h)的基因表达量,Aa4hnr的基因表达量在A.alternata侵染结构分化的各个时期均发生下调,Aa3hnr在附着胞形成阶段(6 h)表达量下调,然而在侵染菌丝形成阶段(8 h)显著上调表达.[结论]Aa4hnr和Aa3hnr对梨果黑斑病菌侵染具有一定的调控作用.
文献关键词：
互隔交链孢;羟基萘还原酶;生物信息学分析;表达分析;侵染结构分化
中图分类号：
作者姓名：
李荣;徐文怡;李永才;毕阳;张苗;蒋倩倩;刘勇翔
作者机构：
甘肃农业大学食品科学与工程学院,甘肃兰州730070
文献出处：
引用格式：
[1]李荣;徐文怡;李永才;毕阳;张苗;蒋倩倩;刘勇翔-.梨果黑斑病菌互隔交链孢(Alternaria alternata)hnr基因的克隆及其对侵染结构分化的调控)[J].微生物学通报,2022(07):2550-2562
A类：
hnr,侵染结构分化,羟基萘还原酶,dihydroxynaphthalene,Aa4hnr,Aa3hnr,51bp,Ophiobolus,disseminans
B类：
梨果黑斑病菌,互隔交链孢,Alternaria,alternata,reductase,HNR,间苯二酚,DHN,黑色素合成,合成途径,致病性,真菌病,原物,调控研究,鲜见,见报,生物信息学分析,药理学,gene,structure,display,server,open,reading,frame,ORF,Finder,conserved,domain,search,相关软件,三环唑,处理分析,qPCR,分化时,表达特性,酶基因,编码区,全长,内含子,进化分析,arborescens,别具,NAD,short,chain,dehydrogenase,SDR,生物合成,疏水性,性诱,疏水表面,孢子萌发,萌发阶段,2h,附着胞,形成阶段,菌丝,基因表达量,生下,表达分析
AB值：
0.200421
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