目的:探究感染水痘-带状疱疹病毒(VZV)对人施万细胞(hSC)朊蛋白(PrPc)、肿瘤坏死因子-α转换酶(TACE)和肿瘤坏死因子-α受体1(TNFR1)表达的影响,及甲钴胺(MCbl)的调节作用.方法:将传代培养的hSC分为:空白对照组、VZV感染组、VZV感染加MCbl干预组、VZV感染PrPc基因(Prnp)siRNA转染细胞组、VZV感染Prnp-siRNA转染细胞加MCbl干预组.设计合成Prnp的siRNA序列转染hSC,构建PrPc表达下调的hSC模型.以感染复数为1.0的VZV分别感染后4组细胞3 d后,加药组分别加入250 μg/ml的MCbl干预.感染7 d后采用CCK-8法评估细胞活力,real time RT-PCR检测Prnp mRNA表达,Western Blot分析PrPc糖基化的变化,免疫荧光双染检测TACE和TNFR1的表达,TACE试剂盒检测其酶活性的变化,酶联免疫吸附试验(ELISA)测定细胞上清液中可溶性TNFR1(sTNFR1)的浓度.结果:与对照组比较,感染组细胞活力明显下降(P＜0.05).感染组细胞Prnp的mRNA表达与对照组相比上调了 2.7倍,PrPc的单糖基化条带密度明显增加.TACE染色颗粒明显变小,TACE活性为对照组的36％,TNFR1表达与对照组比较明显增多,sTNFR1含量为(16.77±4.57)pg/ml.感染加药组Prnp mRNA表达上调3.7倍,显著高于感染组,PrPc向单糖基化迁移的比例较感染组明显减少.TACE染色颗粒变大,且TACE的活性为对照组的76％,TNFR1表达较感染组减少,sTNFR1水平达到(231.23±41.04)pg/ml,较感染组明显增加.Prnp-siRNA转染细胞感染VZV后,TACE和TN-FR1等表达及活性与VZV感染组比较无明显差异,sTNFR1含量与感染组比较无明显差异.Prnp-siRNA转染细胞感染VZV加药组对TACE和TNFR1的表达及活性调节作用不明显,sTNFR1含量与感染组比较无明显差异.结论:VZV可诱导hSC中PrPc稳定性下降,TACE活性降低.而MCbl可稳定PrPc,调节TACE活性,促进TN-FR1的脱落,从而增强hSC的抗TNF-α神经毒性能力.

水痘-带状疱疹病毒;细胞型朊蛋白;肿瘤坏死因子-α转换酶;肿瘤坏死因子-α受体1;甲钴胺;施万细胞

许纲;周朝生;唐维桢;张雨;徐刚;程超;许洁;王晓梅

同济大学附属第十人民医院,上海市第十人民医院,带状疱疹神经痛诊疗中心,上海200072

神经解剖学杂志

[1]许纲;周朝生;唐维桢;张雨;徐刚;程超;许洁;王晓梅-.甲钴胺对VZV病毒感染施万细胞中朊蛋白和TNF-α转换酶表达的影响)[J].神经解剖学杂志,2022(02):171-178

hSC,PrPc,MCbl,Prnp,细胞型朊蛋白

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