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典型文献
过表达微小RNA-130a-3P对LPS诱导心肌细胞损伤的干预作用及其机制
文献摘要:
目的:探讨miRNA-130a-3p对脂多糖(LPS)诱导的心肌细胞自噬与凋亡的影响及分子机制.方法:H9C2心肌细胞随机分为5组,即正常对照组,LPS模型组,miRNA阴性对照组(miRNA-negative control组),miRNA-130a-3p mimics 组(过表达 miRNA-130a-3p),miRNA-130a-3p mimics+LY294002 组(过表达 miRNA-130a-3p+PI3K抑制).LPS模型组即终浓度为10 μg/ml的LPS诱导24 h,miRNA阴性对照组与miRNA-130a-3p mimics组是利用lipo3000将阴性对照miRNA及miRNA-130a-3p mimics转染至H9C2细胞,培养24 h后,再将LPS加入培养基中培养 24 h.miRNA-130a-3p mimics+LY294002 组是利用 lipo3000 将 miRNA-130a-3p mimics 转染至 H9C2 细胞,同时在培养基中加入10 μmol/L(终浓度)的LY294002,培养24 h后,再将浓度为10 μg/ml的LPS加入培养基中培养24 h.所有实验均重复5次以上.利用RT-qPCR检测细胞中miRNA-130a-3p mRNA的表达水平,利用CCK-8实验检测细胞活性,利用ELISA实验检测细胞培养液中肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白细胞介素-6(IL-6),白细胞介素-1β(IL-1β)的含量,利用比色法检测细胞培养液中超氧化物歧化酶(SOD)、乳酸脱氢酶(LDH)的含量;利用Western blot检测细胞中p-PI3K蛋白,p-AKT蛋白,Bax蛋白,Bcl-2蛋白,cleaved-caspase-3蛋白,LC3蛋白,p62蛋白的表达水平.结果:结果显示,与正常组相比较,LPS模型细胞中miRNA-130a-3p mRNA水平,p-PI3K蛋白与p-AKT蛋白的水平显著低于正常对照组(P<0.01);与LPS组相比较,miRNA-130a-3p mimics组细胞中p-PI3K,p-AKT蛋白的表达显著升高(P<0.01,P<0.05);与正常对照组相比较,LPS组细胞活性显著降低,细胞培养液中TNF-α,IL-6,IL-1β及LDH的含量显著升高(P<0.01),SOD的含量显著降低(P<0.01),细胞中Bax蛋白,cleaved caspase-3蛋白,p62蛋白的表达显著升高(P<0.01),Bcl-2蛋白的表达和LC3II/I的比率显著降低(P<0.01);与LPS组相比较,miRNA-130a-3p mimics可提高细胞活性,降低细胞培养液中TNF-α,IL-6,IL-1β及LDH的含量(P<0.01,P<0.05),提高SOD的含量(P<0.05),降低细胞中Bax蛋白,cleaved caspase-3蛋白,p62蛋白的表达(P<0.01),促进Bcl-2蛋白的表达(P<0.01),提高 LC3II/I 的比率(P<0.05);与 miRNA-130a-3p mimics 组相比较,miRNA-130a-3p mimics+LY294002组,可部分逆转miRNA-130a-3p mimics对细胞的作用.结论:过表达miRNA-130a-3p可部分通过激活PI3 K/AKT信号通路促进细胞的自噬与抑制细胞凋亡,减轻LPS诱导的心肌细胞损伤.
文献关键词:
微小RNA-130a-3p;PI3K/AKT信号通路;自噬;细胞凋亡;细胞损伤
作者姓名:
苗莹莹;袁欢欢;黄敏杰;付升旗
作者机构:
新乡医学院三全学院人体解剖学教研室;新乡医学院基础医学院人体解剖与组织胚胎学系,河南新乡453003
引用格式:
[1]苗莹莹;袁欢欢;黄敏杰;付升旗-.过表达微小RNA-130a-3P对LPS诱导心肌细胞损伤的干预作用及其机制)[J].中国应用生理学杂志,2022(04):335-340
A类:
mimics+LY294002,3p+PI3K,lipo3000
B类:
过表达,130a,3P,LPS,心肌细胞损伤,干预作用,miRNA,脂多糖,心肌细胞自噬,H9C2,正常对照,negative,control,ml,转染,qPCR,CCK,实验检测,细胞活性,细胞培养,培养液,比色法,中超,乳酸脱氢酶,LDH,blot,AKT,Bax,Bcl,cleaved,caspase,p62,低于正常,LC3II
AB值:
0.127805
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