目的 探讨塞来昔布对肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导类风湿关节炎(RA)成纤维样滑膜细胞(FLSs)MH7A炎症因子分泌的影响及其机制.方法 以0、2.5、5、10、20和40μmol/L塞来昔布处理MH7A细胞24 h后,采用噻唑蓝(MTT)法检测细胞活力以筛选无毒性作用浓度;采用酶联免疫吸附测定(ELISA)法、实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法和Western blot法分别检测2.5、5、10μmol/L塞来昔布处理TNF-α诱导的MH7A细胞上清液中炎症因子白细胞介素(IL)-6、IL-1β水平和微小RNA(miR)-129-5p表达水平以及高迁移率族蛋白1(HMGB1)表达水平;双荧光素酶报告基因实验检测miR-129-5p和HMGB1的靶向关系;转染miR-129-5p mimics或HMGB1-siRNA至MH7A细胞中,观察miR-129-5p过表达或下调HMGB1表达对TNF-α诱导的MH7A细胞炎症因子分泌的影响;另外,将miR-129-5p inhibitor转染至TNF-α诱导的MH7A细胞中,观察miR-129-5p低表达对10μmol/L塞来昔布作用下TNF-α诱导MH7A细胞炎症因子分泌的影响.结果 与0μmol/L比较,2.5、5、10μmol/L塞来昔布处理后MH7A细胞活性差异无统计学意义(P>0.05),但20和40μmol/L塞来昔布处理后MH7A细胞活性明显降低(P<0.05).在TNF-α诱导下,2.5、5、10μmol/L塞来昔布可呈浓度依赖性抑制MH7A细胞上清液中IL-6、IL-1β水平和细胞中HMGB1蛋白表达并促进miR-129-5p表达;miR-129-5p可与HMGB1靶向结合,且miR-129-5p可负向调控HMGB1蛋白表达;miR-129-5p过表达或下调HMGB1表达后,TNF-α诱导的MH7A细胞上清液中IL-6、IL-1β水平明显降低(P<0.05);并且,miR-129-5p低表达可明显逆转10μmol/L塞来昔布对TNF-α诱导的MH7A细胞上清液中IL-6、IL-1β水平抑制作用.结论 塞来昔布可抑制TNF-α诱导MH7A细胞炎症因子分泌,其作用机制可能与调控miR-129-5p/HMGB1有关.

类风湿关节炎;炎症因子;塞来昔布;微小RNA-129-5p;高迁移率族蛋白1

青岛大学附属医院,山东 青岛 266001

[1]时萍;陶野;王晨静;李欣;柳艳平;曹玉-.塞来昔布调节miR-129-5p/HMGB1抑制TNF-α诱导类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞炎症因子分泌)[J].中国比较医学杂志,2022(09):82-89

塞来昔布,miR,5p,HMGB1,类风湿关节炎,成纤维样滑膜细胞,细胞炎症因子,RA,FLSs,MH7A,噻唑蓝,MTT,细胞活力,无毒性,毒性作用,酶联免疫吸附测定,qPCR,blot,上清液,高迁移率族蛋白,双荧光素酶报告基因实验,实验检测,转染,mimics,siRNA,过表达,inhibitor,低表达,细胞活性,浓度依赖性,平抑,可抑制

0.147875