典型文献
雨生红球藻虾青素合成关键酶的原核表达及纯化
文献摘要：
雨生红球藻是天然虾青素的重要来源,在胁迫条件下积累虾青素含量能达到细胞干重的5％.八氢番茄红素合成酶(PSY)、β-胡萝卜素酮化酶(CRTW)和β-胡萝卜素羟化酶(CRTZ)是雨生红球藻虾青素合成的关键酶,本研究分别以雨生红球藻的DNA和cDNA为模板,克隆了这三个基因,并构建不同的原核表达载体pET-24a-crtw,pET-24a-crtz,pET-24a-psy.转化大肠杆菌Rosetta感受态,经IPTG诱导后,SDS-PAGE和western blotting结果显示三种重组蛋白都能够正常表达,利用6X His标签对重组蛋白进行纯化能得到相对单一的条带,相对于纯化前目的条带明显加深.ELISA检测重组菌株E.coli RZ,E.coli RW,E.coli RP中的酶活性分别为3.0,10.5,10.0 IU/L,纯化后酶活性显著提高,分别为125.5,124.7,118.0 IU/L.本研究获得了这三种酶的活性重组蛋白,为其功能分析和抗体制备奠定了基础.
文献关键词：
雨生红球藻;八氢番茄红素合成酶;β-胡萝卜素酮化酶;β-胡萝卜素羟化酶;原核表达;蛋白纯化;ELISA检测
中图分类号：
[3] 生物科学（Q）
作者姓名：
丛晓梅;臧晓南;王振东;卫雪红;昝佳伟
作者机构：
中国海洋大学海洋生物遗传育种教育部重点实验室,山东青岛266003
文献出处：
引用格式：
[1]丛晓梅;臧晓南;王振东;卫雪红;昝佳伟-.雨生红球藻虾青素合成关键酶的原核表达及纯化)[J].海洋湖沼通报,2022(06):49-56
A类：
CRTW,CRTZ,crtw,crtz
B类：
雨生红球藻,合成关键酶,天然虾青素,胁迫条件,干重,八氢番茄红素合成酶,PSY,胡萝卜素,羟化酶,cDNA,原核表达载体,pET,24a,psy,大肠杆菌,Rosetta,感受态,IPTG,SDS,PAGE,western,blotting,重组蛋白,6X,His,条带,重组菌株,coli,RZ,RW,RP,IU,功能分析,抗体制备,蛋白纯化
AB值：
0.291671
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