典型文献
牙鲆芳香化酶Cyp19a多克隆抗体制备及其应用
文献摘要：
芳香化酶Cyp19a在鱼类性别决定和性别分化中起关键作用,通过调控体内雌、雄激素的转化来影响鱼类性别表型形成.为深入研究Cyp19a在牙鲆(Paralichthys olivaceus)性腺分化和发育过程中的表达规律及作用机制,本文从牙鲆cDNA中克隆获得1557 bp的cyp19a基因编码序列,并成功构建了原核重组表达质粒.经体外重组与纯化获得较高纯度的重组Cyp19a蛋白;以此作为抗原免疫兔子,制备多克隆抗体.用间接酶联免疫吸附剂测定(ELISA)技术检测抗血清效价,评估其免疫原性.结果表明免疫结束后得到的抗体血清效价超过了1:50000,且纯化后抗体具有较好活性.Western Blot(WB)检测结果表明Cyp19a兔多抗可以特异性识别牙鲆重组Cyp19a蛋白和内源性Cyp19a蛋白.蛋白水平的雌雄性腺差异表达分析显示,牙鲆Cyp19a蛋白在卵巢中高表达,在精巢中微量表达.利用Foxl2和Dmrt1重组蛋白处理牙鲆性腺分化期幼鱼可分别显著上调和下调Cyp19a的表达(P<0.05).综上所述,本研究成功制备了牙鲆Cyp19a多克隆抗体并进行了应用,为深入研究牙鲆等鱼类性别分化机制提供有力工具.
文献关键词：
牙鲆(Paralichthys olivaceus);Cyp19a;重组蛋白;多克隆抗体;蛋白表达
中图分类号：
作者姓名：
舒畅;王丽娟;邹聪聪;邹玉霞;王国玉;吴志昊;李泽;尤锋
作者机构：
中国科学院 海洋研究所 实验海洋生物学重点实验室 海洋大科学中心 山东省实验海洋生物学重点实验室,山东 青岛 266071;青岛海洋科学与技术试点国家实验室 海洋生物学与生物技术功能实验室,山东 青岛 266237;中国科学院大学,北京 100049
文献出处：
引用格式：
[1]舒畅;王丽娟;邹聪聪;邹玉霞;王国玉;吴志昊;李泽;尤锋-.牙鲆芳香化酶Cyp19a多克隆抗体制备及其应用)[J].海洋科学,2022(11):83-93
A类：
Cyp19a,cyp19a
B类：
牙鲆,芳香化酶,多克隆抗体制备,鱼类,性别决定,性别分化,雄激素,Paralichthys,olivaceus,性腺分化,表达规律,cDNA,bp,基因编码,编码序列,原核,重组表达,质粒,高纯度,兔子,间接酶联免疫吸附,免疫吸附剂,抗血清,效价,免疫原性,Blot,WB,多抗,特异性识别,内源性,雌雄,差异表达分析,巢中,精巢,Foxl2,Dmrt1,重组蛋白,幼鱼,综上所述,分化机制
AB值：
0.284207
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