目的 观察c-Myc蛋白在宫颈癌HeLa细胞中的表达,探讨胡桃醌通过影响c-Myc蛋白泛素化降解进而影响HeLa细胞的增殖与凋亡.方法 培养人宫颈癌HeLa细胞,分为对照组:正常培养;10、20、50μmol/L胡桃醌组:培养液中分别加入对应浓度的胡桃醌.以Western blot方法分析胡桃醌处理后c-Myc蛋白的表达.HeLa细胞分为对照组和20μmol/L胡桃醌组,在培养0、2、4、8 h分别用Western blot检测c-Myc蛋白表达的变化;放线菌酮(CHX)法检测c-Myc蛋白半衰期的变化;CoIP方法检测c-Myc蛋白降解影响.HeLa细胞分为空白对照组:正常培养;胡桃醌组:20μmol/L胡桃醌培养液培养;0.5、1.0、2.0μmol/L MG132组:分别与0、1.0、2.0μmol/L蛋白酶体抑制剂MG132加20μmol/L胡桃醌培养,检测c-Myc蛋白表达的水平.将si c-Myc转染入HeLa细胞后,将细胞分siNC组:空载体组;si-NC;胡桃醌组:空载体加20μmol/L胡桃醌处理;si-cMyc组:转染Myc RNA;si-cMyc20μmol/L胡桃醌组:转染Myc RNA加20μmol/L胡桃醌处理.MTT及流式细胞术检测20μmol/L胡桃醌处理后对敲除及未敲除c-Myc基因的细胞增殖及凋亡的影响.结果 与对照组相比,不同浓度胡桃醌可下调c-Myc蛋白表达且曾时间及剂量依赖性(P<0.05;P<0.01);胡桃醌可缩短c-Myc蛋白的半衰期,加入不同浓度的MG132后,即可明显上调c-Myc蛋白水平(P<0.05;P<0.01).未用胡桃醌组相比,胡桃醌可明显增加c-Myc蛋白的泛素降解水平.未敲除c-Myc组相比,敲除组在胡桃醌处理后吸光度值明显增加(P<0.05)和早期凋亡率明显下降(P<0.05).结论 胡桃醌通过影响c-Myc蛋白的泛素化降解过程,进而抑制HeLa细胞增殖并促进其凋亡的发生.

胡桃醌;宫颈癌;HeLa;c-Myc;泛素化

吉林医药学院生化教研室,吉林 吉林 132013;延边大学基础医学院生化教研室,吉林 延边 133000

[1]赵行宇;杨昆;宋梓桐;何涵;张巍-.胡桃醌通过促进c-Myc泛素化降解抑制宫颈癌细胞的生长和促进凋亡)[J].南方医科大学学报,2022(07):1026-1031

cMyc20

胡桃醌,宫颈癌细胞,HeLa,蛋白泛素化,细胞的增殖,培养液,别加,blot,放线菌酮,CHX,半衰期,CoIP,蛋白降解,空白对照,MG132,蛋白酶体抑制剂,转染,siNC,空载,MTT,流式细胞术,敲除,可下,剂量依赖,量依赖性,未用,吸光度值,凋亡率,降解过程

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