目的:观察电针对衰老小鼠体力及肝脏AMP活化的蛋白激酶(AMPK)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、unc-51样自噬激活激酶1(ULK1)、Atg5、Atg7、Atg13和Beclin1表达的影响,探索其通过激活AMPK/mTOR/ULK1通路延缓衰老的机制.方法:将30周龄雄性SAMP8小鼠随机分为模型组、雷帕霉素组、电针组、电针+抑制剂组,每组6只,以同周龄抗快速衰老SAM R1小鼠6只作为对照组.雷帕霉素组予以腹腔注射诱导自噬药物雷帕霉素(2 mg·kg-1·d-1);电针组予以电针双侧"太冲""肾俞",每次15 min;电针+抑制剂组电针治疗前予以腹腔注射自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(1.5 mg·kg-1·d-1).各组均每周干预6 d,连续2周.采用力竭游泳实验观察小鼠体力变化;HE染色法观察小鼠肝脏病理形态变化;Western blot法检测小鼠肝脏AMPK/mTOR/ULK1信号通路相关蛋白表达;实时荧光定量PCR法检测小鼠肝脏自噬相关基因表达水平;免疫组织化学法观察小鼠肝脏血红素加氧酶1(HO-1)表达;羟胺法检测小鼠肝脏超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量.结果:与对照组比较,模型组小鼠力竭游泳时间明显缩短(P<0.01);肝脏AMPK、磷酸化(p)-AMPK、ULK1、p-ULK1蛋白及Atg5、Atg7、Atg13、Beclin1、ULK1 mRNA表达,肝脏HO-1阳性表达及SOD活性均明显下降(P<0.01);肝脏mTOR、p-mTOR蛋白表达及MDA含量升高(P<0.01).与模型组比较,雷帕霉素组、电针组、电针+抑制剂组力竭游泳时间延长(P<0.01,P<0.05);AMPK、p-AMPK、ULK1、p-ULK1蛋白及Atg5、Atg7、Atg13、Beclin1、ULK1 mRNA表达,肝脏HO-1阳性表达及SOD活性上升(P<0.01,P<0.05);肝脏mTOR、p-mTOR蛋白表达及MDA含量下降(P<0.01,P<0.05).与雷帕霉素组和电针组比较,电针+抑制剂组小鼠力竭游泳时间缩短(P<0.01),肝脏AMPK、p-AMPK、ULK1、p-ULK1蛋白及Atg5、Atg7、Atg13、Beclin1、ULK1 mRNA表达,肝脏HO-1阳性表达及SOD活性均明显下降(P<0.01);肝脏mTOR、p-mTOR蛋白表达及MDA含量明显升高(P<0.01).模型组小鼠肝细胞排列散乱,细胞呈空泡样改变;雷帕霉素组、电针组肝细胞排列较整齐,细胞空泡减少;电针+抑制剂组肝组织病理形态改善不明显.结论:电针可通过调节自噬相关信号通路AMPK/mTOR/ULK1促进衰老小鼠肝脏自噬的发生,进而抑制其过度的氧化应激,可在一定程度上延缓机体衰老的过程.

肝脏;电针;自噬;氧化应激;抗衰老

杨云昊;陶春鹤;庞芳;杨之雪;朱正威;郭啸;廖冬梅;代攀;唐成林

重庆医科大学中医药学院,重庆400016

针刺研究

[1]杨云昊;陶春鹤;庞芳;杨之雪;朱正威;郭啸;廖冬梅;代攀;唐成林-.电针通过调节AMPK/mTOR/ULK1信号通路对衰老小鼠肝脏自噬与氧化应激的影响)[J].针刺研究,2022(01):7-14

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