目的:探究微小RNA-23a-3p(miR-23a-3p)对非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)小鼠肝脏脂质代谢的影响及沉默信息调节因子1(SIRT1)/叉头框蛋白O1(FOXO1)通路在其中的作用.方法:qPCR检测miR-23a-3p在脂肪肝细胞模型及NAFLD小鼠模型中的表达情况.高脂饮食(HFD)诱导miR-23a-3p基因敲除(miR-23a KO)小鼠,设置野生型(WT)C57BL/6小鼠正常饮食(ND)组和HFD组及miR-23a KO小鼠ND组和HFD组,每组10只,HFD组小鼠均接受HFD 12周.对各组小鼠体重和肝脏指数进行统计;HE染色观察肝组织病理损伤变化;油红O染色检测肝脏组织脂质蓄积程度;生化分析检测血清中总胆固醇(TC)、甘油三脂(TG)、丙氨酸转氨酶(AST)、天冬氨酸转氨酶(ALT)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平;qPCR检测肝脏脂代谢相关基因Srebp1、Fas、Pparγ、Pparα、Acc1和Cpt1的mRNA水平;双萤光素酶报告基因实验分析miR-23a-3p和SIRT1基因的靶向关系;Western blot检测AMP活化蛋白激酶(AMPK)、SIRT1、过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPARα)及FOXO1蛋白的表达.结果:与对照组比较,脂肪肝细胞模型、动物模型及db/db小鼠肝组织中miR-23a-3p表达显著升高.与HFD(WT)组比较,HFD(miR-23a KO)组体重和肝脏脏器系数显著降低;HE和油红O染色结果显示,HFD(miR-23a KO)组肝脏脂肪蓄积减轻;血清TC、TG、AST和LDL-C水平显著降低(P<0.05),HDL-C水平显著升高(P<0.05);脂代谢相关基因Srebp1、Fas、Pparγ和Acc1的mRNA水平显著降低(P<0.05),Cpt1的mRNA水平显著升高(P<0.05).双萤光素酶报告基因实验证明miR-23a-3p可以靶定SIRT1基因.Western blot结果显示,与HFD(WT)组比较,HFD(miR-23aKO)组SIRT1和PPARα表达显著增加(P<0.05),p-AMPK/AMPK比值显著升高(P<0.05),Ac-FOXO1/FOXO1比值显著降低(P<0.01).结论:miR-23a-3p的缺失能够减轻HFD诱导的NAFLD小鼠肝脏脂质蓄积,改善肝脏的生理功能.miR-23a-3p的作用可能是通过靶定SIRT1基因而使FOXO1去乙酰化,进而影响肝脏脂质代谢.

微小RNA-23a-3p;非酒精性脂肪性肝病;SIRT1/FOXO1信号通路;脂质代谢

孙雪莲;杨佳楠;姜同连;朱福彬;于闪闪;李响;李洪志

北华大学基础医学院,吉林吉林132000;吉林省肾脏病基因测序精准医疗创新中心,吉林吉林132000

中国病理生理杂志

[1]孙雪莲;杨佳楠;姜同连;朱福彬;于闪闪;李响;李洪志-.miR-23a-3p通过调控SIRT1/FOXO1通路影响NAFLD小鼠肝脏脂质代谢的研究)[J].中国病理生理杂志,2022(12):2175-2182

Srebp1,23aKO

miR,3p,SIRT1,FOXO1,NAFLD,小鼠肝脏,肝脏脂质代谢,非酒精性脂肪性肝病,沉默信息调节因子,叉头框蛋白,qPCR,脂肪肝,肝细胞,细胞模型,小鼠模型,高脂饮食,HFD,基因敲除,野生型,WT,C57BL,正常饮食,ND,肝脏指数,HE,肝组织病理,病理损伤,损伤变化,肝脏组织,生化分析,分析检测,总胆固醇,甘油三脂,丙氨酸转氨酶,AST,天冬氨酸转氨酶,ALT,高密度脂蛋白胆固醇,HDL,低密度脂蛋白胆固醇,LDL,肝脏脂代谢,脂代谢相关基因,Fas,Ppar,Acc1,Cpt1,萤光,报告基因,blot,蛋白激酶,AMPK,过氧化物酶体增殖物激活受体,PPAR,动物模型,db,脏器系数,染色结果,肝脏脂肪蓄积,失能,肝脏脂质蓄积,生理功能,去乙酰化

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