目的:观察针刀对膝关节骨关节炎(KOA)大鼠软骨细胞自噬及自噬相关蛋白、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)表达的影响,探究针刀干预KOA的可能机制.方法:将42只SD大鼠随机分为正常组、模型组和针刀组,每组14只.除空白组外,其余2组采用左侧后肢膝关节腔注射木瓜蛋白酶和L-半胱氨酸混合液制备大鼠KOA模型.造模后,针刀组以大鼠患侧股四头肌腱和内、外侧副韧带附近的条索或结节作为进针点行针刀干预,每周1次,共干预3次(3周).观察各组大鼠左侧膝围变化;HE染色法和透射电镜观察各组大鼠左侧膝关节软骨细胞及超微结构形态;实时荧光定量PCR和Western blot法检测大鼠左侧膝关节软骨组织自噬相关基因(Atg5、Atg12、Atg4a)、Unc-51样自噬激活激酶1(ULK1)、自噬基因Beclin-1及mTOR的mRNA和蛋白表达.结果:造模后,模型组、针刀组左侧膝围均较本组造模前及正常组增加(P<0.05);干预后,针刀组左侧膝围小于模型组及本组造模后(P<0.05).与正常组比较,模型组大鼠软骨细胞数量减少,少数细胞肿胀,细胞核皱缩,线粒体肿胀,自噬体减少;与模型组比较,针刀组大鼠软骨细胞数量增多,多数细胞结构恢复正常,自噬体增多.与正常组比较,模型组大鼠膝关节软骨组织Atg5、Atg12、Atg4a、Beclin-1、ULK1 mRNA和蛋白表达降低(P<0.05);与模型组比较,针刀组大鼠以上指标表达升高(P<0.05).与正常组比较,模型组大鼠膝关节软骨组织mTOR mRNA和蛋白表达升高(P<0.05);与模型组比较,针刀组大鼠以上指标表达降低(P<0.05).结论:针刀干预能改善KOA模型大鼠膝关节软骨损伤,其机制可能与降低mTOR的表达,上调Atg5、Atg12、Atg4a、ULK1、Beclin-1的表达,从而促进KOA大鼠软骨细胞自噬,延缓软骨细胞的衰老退变有关.

膝关节骨关节炎;针刀;关节软骨;细胞自噬

卢曼;黄小双;孟德鸿;陈倩;李韬;汪宗保;杨永晖;耿凯

安徽中医药大学研究生院,合肥230038;安徽中医药大学第三临床医学院针刀康复科,合肥230031

中国针灸

[1]卢曼;黄小双;孟德鸿;陈倩;李韬;汪宗保;杨永晖;耿凯-.针刀对膝关节骨关节炎大鼠mTOR/Atg/ULK1/Beclin-1轴及软骨细胞自噬的影响)[J].中国针灸,2022(01):59-65

Atg4a

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