收集阴道毛滴虫分泌蛋白(TvESP),用蛋白浓度测定试剂盒测定TvESP浓度,并进行十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)鉴定.从昆明小鼠的附睾收集精子并调整精子密度为1×107/ml.将小鼠精子分为0、5、10、20、40、80 ng/μl浓度组(每组设3个平行孔),分别与终浓度为0、5、10、20、40、80 ng/μl的TvESP共培养1 h,倒置显微镜下观察精子活力,细胞流式检测精子凋亡情况;小鼠精子与TvESP作用0.5、1、2 h后,台盼蓝染液染色,计算精子死亡率;小鼠精子分别与终浓度为0和40 ng/μl的TvESP共培养1 h,荧光染料染色,荧光显微镜下观察精子顶体结构.组间比较采用单因素方差分析.结果显示,TvESP作用1 h后,5、10、20、40、80 ng/μl浓度组活力精子占比分别为(31.90±4.10)％、(23.00±4.90)％、(18.80±3.50)％、(13.60±1.20)％和(8.60±1.20)％,均低于0 ng/μl浓度组的(44.50±3.20)％(F=30.76,P<0.01);5、10、20、40、80 ng/μl浓度组精子的晚期凋亡率分别为(17.99±1.73)％、(22.43±1.53)％、(26.76±2.20)％、(32.05±1.68)％和(41.37±2.28)％,均高于0 ng/μl浓度组的(15.42±1.10)％(F=256.79,P<0.01).TvESP作用0.5 h后,10、20、40和80 ng/μl浓度组精子的死亡率分别为(11.90±1.70)％、(14.10±1.40)％、(16.30±1.20)％、(17.90±1.30)％,均高于0 ng/μl浓度组的(7.80±1.10)％(F=15.72,P<0.05);TvESP作用1 h后,5、10、20、40、80 ng/μl浓度组精子的死亡率分别为(12.90±0.90)％、(14.60±0.90)％、(16.20±1.30)％、(18.10±1.10)％、(20.00±1.40)％,均高于0 ng/μl浓度组的(9.90±1.90)％(F=15.76,P<0.01);TvESP作用2 h后,10、20、40、80 ng/μl浓度组精子的死亡率分别为(17.00±1.20)％、(18.30±1.20)％、(20.50±1.20)％、(22.80±1.50)％,均高于0 ng/μl浓度组的(12.90±0.50)％(F=22.22,P<0.01).TvESP作用1 h后,40 ng/μl浓度组精子的顶体轮廓不清、结构完整性被破坏.TvESP可降低精子质量.

阴道毛滴虫;分泌蛋白;小鼠;精子质量

罗澄扬;郝利霞;郭丽华;王兵立;纪思帆;连安娜;朱晓慧;梅雪芳;田晓薇;王帅;张振超

新乡医学院基础医学院,新乡 453003;新乡医学院新乡市病原生物学重点实验室,新乡 453003;新乡市妇幼保健院,新乡 453003

中国寄生虫学与寄生虫病杂志

[1]罗澄扬;郝利霞;郭丽华;王兵立;纪思帆;连安娜;朱晓慧;梅雪芳;田晓薇;王帅;张振超-.阴道毛滴虫分泌蛋白对小鼠精子质量的影响)[J].中国寄生虫学与寄生虫病杂志,2022(02):236-241

TvESP,荧光染料染色

阴道毛滴虫,分泌蛋白,精子质量,蛋白浓度,试剂盒,十二烷基硫酸钠,聚丙烯酰胺凝胶电泳,SDS,PAGE,昆明小鼠,附睾,精子密度,ml,平行孔,共培养,倒置,显微镜下,精子活力,台盼蓝,蓝染,染液,荧光显微镜,单因素方差分析,凋亡率,结构完整性

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