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典型文献
重组人Neuritin蛋白生物学活性的定量分析方法
文献摘要:
目的 建立一种快速高效地定量评价重组人Neuritin(rhNeuritin)蛋白生物学活性的新方法.方法 首先建立小鼠海马神经元细胞(HT22细胞)维持培养条件.在此条件下,明确rhNeuritin蛋白作用于HT22细胞的最佳检测时间.根据11组不同浓度梯度的rhNeuritin蛋白对HT22细胞存活的影响,建立标准品rhNeuritin蛋白与HT22细胞存活的量效关系曲线;并确定rhNeuritin蛋白的检测范围.在rhNeuritin蛋白的检测限内,根据标准品rhNeuritin蛋白与HT22细胞存活之间的量效关系的拟合曲线,制订标准品蛋白的活性单位,建立了针对rhNeuritin蛋白生物学活性的评价体系.利用两批测试品rhNeuritin蛋白,对该方法的重复性和准确性进行了验证.结果 HT22细胞的维持培养液的浓度为0.4%FBS,rhNeuritin蛋白作用于HT22细胞的最佳检测时间为72 h,rhNeuritin蛋白浓度在62.5~1000 ng·mL-1的检测限内,HT22细胞的存活与rhNeuritin蛋白的浓度呈正相关.在rhNeuritin蛋白的检测线内,拟定标准品的EC50为一个活性单位.两组测试品rhNeuritin蛋白的量效关系曲线与标准品呈现相同趋势,3者R2均大于0.9,说明该方法的重复性很好.通过拟订的标准品的活性单位,计算得到500 ng·mL-1时测试品1和测试品2的活性单位分别为1.059、1.069,而实验实际测得测试品1和测试品2的活性单位分别为1.074和1.088,与测定的活性单位相比,两组测试品计算得到的活性单位的误差小于2%,说明该实验方法具有较好的准确性.结论 成功建立了重组人Neuritin蛋白的定量检测方法,并制定了明确的活性单位.
文献关键词:
重组人Neuritin蛋白;小鼠海马神经元HT22细胞;细胞存活率;活性单位
作者姓名:
王宿洁;宋丹丹;李煜;孟平平;朱金辉;朱礼彦;黄瑾
作者机构:
石河子大学医学院,新疆石河子 832000;杭州师范大学公共卫生学院,浙江杭州 310036
引用格式:
[1]王宿洁;宋丹丹;李煜;孟平平;朱金辉;朱礼彦;黄瑾-.重组人Neuritin蛋白生物学活性的定量分析方法)[J].石河子大学学报(自然科学版),2022(05):611-619
A类:
rhNeuritin
B类:
组人,生物学活性,定量分析方法,快速高效,定量评价,小鼠海马神经元,海马神经元细胞,HT22,培养条件,此条,检测时间,浓度梯度,标准品,量效关系,关系曲线,检测范围,检测限,拟合曲线,活性单位,两批,培养液,FBS,蛋白浓度,检测线,拟定,EC50,拟订,位相,实验方法,定量检测,细胞存活率
AB值:
0.184231
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