目的:利用流式细胞技术建立一种检测胰岛β细胞去分化状态的方法。方法:实验研究。常规培养胰岛Min6（小鼠β细胞系）、αTC1-6（小鼠α细胞系）、HepG2（人肝癌细胞）和F9细胞（小鼠畸胎瘤细胞）。白细胞介素1β（IL-1β）合并肿瘤坏死因子α（TNFα）或棕榈酸（PA）过夜处理Min6细胞制备β细胞去分化模型。细胞染色采用抗-嗜铬粒蛋白A（ChgA）、抗-胰岛素（Ins）、抗-胰高血糖素（Gcg）、抗-SRY盒转录因子9（Sox9）和抗-八聚体结合转录因子4（Oct4）抗体进行，流式细胞技术鉴定细胞蛋白表达情况。统计学方法采用独立样本 t检验。 结果:流式细胞实验结果显示Min6细胞高度表达Ins和ChgA，αTC1-6细胞高度表达Gcg，HepG2细胞高度表达Sox9，F9细胞高度表达Oct4，阳性率在90%左右。炎性因子（IL-1β+TNFα）处理Min6细胞导致Ins染色阳性细胞数量明显降低（92.775%±1.702%比97.125%±0.246%， P=0.045），Sox9染色阳性细胞增加（41.675%±0.390%比25.875%±3.348%， P=0.003），但ChgA和Oct4染色无明显变化（ P值均>0.05）。PA处理Min6细胞后，Gcg染色阳性细胞数量上升（54.500%±3.597%比41.160%±3.007%， P=0.022）。实时荧光定量PCR检测mRNA结果与流式细胞仪检测结果的趋势一致。 结论:利用流式细胞技术可检测各去分化模型中不同标志蛋白的表达情况，为判断胰岛β细胞的去分化状态提供了新的手段。

胰岛素分泌细胞;细胞去分化;流式细胞术;胰岛β细胞

李倩;申超;王琛

上海交通大学医学院附属第六人民医院内分泌代谢科　上海市糖尿病研究所　上海市糖尿病重点实验室，上海　200233

中华内科杂志

[1]李倩;申超;王琛-.流式细胞技术检测胰岛β细胞去分化蛋白表达的研究)[J].中华内科杂志,2022(12):1318-1323

ChgA,Gcg,胰岛素分泌细胞

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